產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3762 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
勞森菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Lawsonia spp. | LZR3762 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
球形賴氨酸芽孢桿菌Monkey ApoA4 (Apolipoprotein A4) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
近平滑假絲酵母Monkey S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit拉丁屬名: Candida parapsilosis
波蘭青霉Monkey PTPRB (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type B ) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium polonicum
緩慢葡萄球菌Monkey ADCY2 (Adenylate Cyclase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus lentus
釀酒酵母Monkey BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
植物乳桿菌Monkey ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
赤曲霉Monkey LMWH (Low Molecular Weight Heparin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus ruber
刺黑烏霉Monkey S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
煙色毛霉Monkey CMR (Costimulatory Molecules Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor fumosus
嗜熱鏈球菌Monkey OXA (Orexin A) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus thermophilus
Aquibacillus halophilusMonkey BLI (β-Lactamase Inhibitors) ELISA Kit拉丁屬名: Aquibacillus halophilus
角鱗灰鵝膏菌Monkey HTRA1 (HtrA Serine, Peptidase 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鐮孢菌Monkey SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
泡囊短波單胞菌Monkey VPI (Vasoactive Peptidase Inhibitors) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas vesicularis
溜曲霉Monkey CXCR1 (CXC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tamarii
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BRP44 腦蛋白44抗體石斛堿7,5-(Epoxymethano)-1H-cyclopent[cd]indol-9-one,decahydro-1,7b-dimethyl-6-(1-methylethyl)-, (2aS,4aS,5R,6S,7R,7aS,7bR)-中藥標準品 分 子 式: C16H25NO2 分 子 量: 263.3752
BRP44L 腦蛋白44樣蛋白抗體苯甲酰次烏頭堿Benzoylhypacoitine化學標準品 分 子 式: C31H43NO9 分 子 量: 573.29
BRPF3 BRPF3蛋白抗體訶子寧b-D-Glucopyranose,1-(3,4,5-trihydroxybenzoate), cyclic 2®2:4®1-ester with (2S)-2-[(3S,4S)-5-carboxy-3,4-dihydro-3,7,8-trihydroxy-2-oxo-2H-1-benzopyran-4-yl]butanedioicacid化學標準品 分 子 式: C27H24O19 分 子 量: 652.46806
LMO2 T淋巴細胞易位蛋白2抗體雅姆皂苷元yamogenin中藥標準品 分 子 式: C27H42O3 分 子 量: 414.62