產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3781 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
長須白蛉探針法熒光定量PCR試劑盒 | Lutzomyia longipalpis | LZR3781 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
卷枝毛霉LUM (Lumican) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides
釀酒酵母MRP (Multidrug Resistance-Associated Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
運動節桿菌Gp49a (Glycoprotein 49A) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis
發酵性酵母BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鹽水球菌TWEAK (Tumour Necrosis Factor Related Weak Inducer of Apoptosis) ELISA Kit用途: 教學 科研
唐菖蒲青霉OSM (Oncostatin M) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium gladioli
發根根瘤菌CK (Creatine Kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
毛栓孔菌CKMB (Creatine Kinase MB Isoenzyme) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes hirsuta
盤長孢菌*IL1R1 (Interleukin 1 Receptor Type I) ELISA Kit 拉丁屬名: Gloeosporium sp.
庫氏類芽孢桿菌NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus cookii
鱗蓋紅菇PP (Pancreatic Polypeptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
有柄靈芝MUC6 (Mucin 6) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
普通鏈孢囊菌MIgM (Membrane IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Streptosporangium vulgare
根瘤菌COL8α1 (Collagen Type VIII Alpha 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
厚垣孢普可尼亞菌GSTα4 (Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit 用途: 用作生物防治研究
長須白蛉探針法熒光定量PCR試劑盒 Phospho-NMDAR2A + 2B (Tyr1246 + Tyr1252) 磷酸化谷氨酸受體2A+2B抗體千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷甲酯Oroxylin A 7-O-beta-D-glucuronide methyl ester化學標準品 分 子 式: 分 子 量:
Wnt11 信號通路Wnt11抗體Tinnevellin glucosideTinnevellin glucoside化學標準品 分 子 式: C20H24O9 分 子 量: 408.39916
TFE3 轉錄因子E3鐵屎米酮 N氧化物3-oxy-indolo[3,2,1-de][1,5]naphthyridin-6-one化學標準品 分 子 式: C14H8N2O2 分 子 量: 236.226
NGN1/Neurogenin 1 神經元素1抗體維生素AVitamin A中藥標準品 分 子 式: C20H30O 分 子 量: 286.452
Ubiquityl Histone H2A.X (Lys119) 泛素化組蛋白H2AX抗體13(18)-齊墩果烯-3-醇13(18)-Oleanen-3-ol對照藥材 分 子 式: C30H50O 分 子 量: 426.7174
phospho-CPLA2(Ser505) 磷酸化胞漿型磷脂酶A2抗體硫酸長春質堿Catharanthine Sulfate中藥標準品 分 子 式: C21H26N2O6S 分 子 量: 434.51
DHRS2 脫氫酶/還原酶家族成員2抗體脫水穿心蓮內酯Dehydroandrographolide中藥標準品 分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43