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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
單核細胞增生李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3777
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3777
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

單核細胞增生李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Listeria monocytogenes

LZR3777


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

谷氨酸棒桿菌Monkey ANG (Angiostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

層迭靈芝Monkey CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma lobatum

微金放線菌Monkey IL1R1 (Interleukin 1 Receptor Type I) ELISA Kit 拉丁屬名: Actinomyces  aurigineus

約翰遜鎖擲孢酵母Monkey MAF (Macrophage Activating Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Sporidiobolus johnsonii

木拉克酵母Monkey REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha) ELISA Kit 用途: 飼料用酶的篩選

粘孢白僵菌Monkey TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治

枯草芽孢桿菌Monkey FASN (Fatty Acid Synthase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

屎腸球菌Monkey CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus  faecium

芽孢桿菌屬Monkey CCR8 (Chemokine C-C-Motif Receptor 8) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  sp.

腫大地桿菌Monkey 6-OHDA (6-Hydroxydopamine) ELISA Kit拉丁屬名: Terrabacter terrae

地霉雙足囊菌Monkey C/EBPα (CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Dipodascus geotrichum

棒狀乳桿菌棒狀亞種Monkey ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  coryniformis subsp. coryniformis

細極鏈格孢Monkey Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

氣生鞘氨單胞菌Monkey PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas aerolata

三葉草根瘤菌Monkey PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮
單核細胞增生李斯特菌探針法熒光定量PCR試劑盒 EP4R/Prostaglandin E Receptor EP4  素E受體蛋白4抗體Ophiopojaponin C中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

Luciferase  熒光素酶抗體乙酰桉樹素Eucalyptin acetate化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

TSHZ3/ZNF537  鋅指蛋白537抗體脫氫紫堇堿Dehydrocorydaline中藥標準品  分 子 式: C22H24NO4+.Cl- 分 子 量: 401.88326

CLECSF9/CLEC 4E  C型凝集素4家族E抗體王不留行環肽ASegetalin A中藥標準品  分 子 式: C31H43N7O6 分 子 量: 609.71642

MSH3  錯配修復蛋白3抗體乙酸鈉溶液(3mol/L,pH5.2,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PPY/Pancreatic hormone  胰腺激素抗體丙酮酸2-Oxopropanoic acid化學標準品 分 子 式: C3H4O3 分 子 量: 88.06206

GABR B3/GABA A Receptor beta 3  G氨基丁酸受體3抗體九里香亭,九里香素,長葉九里香內酯二醇2H-1-Benzopyran-2-one,8-[(1R,2S)-1,2-dihydroxy-3-methyl-3-buten-1-yl]-7-methoxy-, rel-(-)-對照藥材 分 子 式: C15H16O5 分 子 量: 276.28454

 


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