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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
碩大利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3767
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3767
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

碩大利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Leishmania major

LZR3767

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

地霉半乳糖酵母Monkey PLCγ2 (Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Galactomyces geotrichum

德氏乳桿菌保加利亞亞種Monkey FAIM3 (Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

明尼蘇達被毛孢Monkey EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Hirsula minnesotensis

Novosphingobium panipatenseMonkey IL-16 (Interleukin 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Novosphingobium panipatense

雜色曲霉Monkey IgG3 (Immunoglobulin G3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母Monkey NUP35 (Nucleoporin 35kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

中國毛霉Monkey PLCβ1/PI-PLC (Phospholipase C Beta 1, Phosphoinositide Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor sinensis

大腸埃希氏菌Monkey MSR1 (Macrophage Scavenger Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

微黃八疊球菌Monkey SOX1 (Sex Determining Region Y Box Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Sarcina  sp.

韓國生孢八疊球菌Monkey ELMO2 (Engulfment And Cell Motility 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Sporosarcina koreensis

貪噬菌屬Monkey FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁屬名: Variovorax  ginsengisoli

紅球菌Monkey CK-LMW (Cytokeratin Low Molecular Weight) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus sp.

季也蒙畢赤酵母Monkey PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia  guilliermondii

棲泥鹽鹽八疊球菌Monkey PRB (Retinoblastoma Tumor Suppressor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Halosarcina limi

布氏假單胞菌Monkey GPC4 (Glypican 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  brenneri
碩大利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FKSG14/Centromere protein K  著絲粒蛋白K牡荊內酯Vitexilactone中藥標準品  分 子 式: C22H34O5 分 子 量: 378.50236

FNDC1  Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1羅斯試劑(Rous Reagent)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

MX2/MXB  干擾素誘導GTP結合蛋白MX2抗體二十三酸TRICOSANOIC ACID化學標準品 分 子 式: C23H46O2 分 子 量: 354.61014

APLP2  淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體日蟾毒它靈中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

ZNF804A  鋅指蛋白804A抗體二氫愈創木脂酸Dihydroguaiaretic-acid對照藥材 分 子 式: C20H26O4 分 子 量: 330.41804

SENP5  泛素相關修飾蛋白特異性蛋白酶5抗體5-甲氧基山奈酚; 5-甲氧基莰非醇4H-1-Benzopyran-4-one, 3,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-5-methoxy-化學標準品 分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288

APLP1  淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體異阿魏酸3-(3-Hydroxy-4-methoxyphenyl)acrylic acid中藥標準品  分 子 式: C10H10O4 分 子 量: 194.184

 


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