產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3758 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
七星庫道蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Kudoa septempunctata | LZR3758 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:
橙色桿菌屬Monkey CNTNAP4 (Contactin Associated Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Sandarakinorhabdus arctica
貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Monkey PHC (Primary Hepatic Carcinoma)ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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氧化節桿菌Monkey GOD (Glucose Oxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter oxydans
細孢毛霉Monkey PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor subtilissimus
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吸水鏈霉菌Monkey ALT (Alanine Transaminase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hygroscopicus
pMV306hsp+LuxG13(addgene26161)Monkey SYP (Synaptophysin) ELISA Kit拉丁屬名: pMV306hsp+LuxG13(addgene26161)
豌豆根瘤菌Monkey C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit用途: 與豌豆、蠶豆、苕子共生固氮
枯草芽孢桿菌Monkey PIK3Cσ (Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Delta Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
立枯絲核菌Monkey CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
多主葡萄殼菌Monkey CMLC-1 (Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
食鹿角菜假交替單胞菌Monkey β2-GP (Beta2 Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudoalteromonas carrageenovora
番茄枯萎病菌Monkey TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
膠凍樣類芽孢桿菌Monkey ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Paenibacillus mucilaginosus
七星庫道蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規格BTBD10 BTB/POZ結構域蛋白10抗體原薯蕷皂苷Protodioscin中藥標準品 分 子 式: C51H84O22 分 子 量: 1049.19946
BTBD17 BTB/POZ結構域蛋白17抗體羥基酪醇醋酸酯Hydroxytyrosol acetate中藥標準品 分 子 式: C10H12O4 分 子 量: 196.202
ANGL2/ANGPTL2 生成素樣蛋白2抗體氯化飛燕草素-3,5-O-二葡萄糖苷1-Benzopyrylium,3,5-bis(b-D-glucopyranosyloxy)-7-hydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-,chloride (1:1)化學標準品 分 子 式: C27H31O17+.Cl- 分 子 量: 662.97784
BTBD19 BTB/POZ結構域蛋白19抗體千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷Oroxyloside中藥標準品 分 子 式: C22H20O11 分 子 量: 460.3876
GCLC/GCLM γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗體(γ-GCSc)5-羥基-4,7-二甲氧基黃酮5-Hydroxy-7-methoxy-2-(4-methoxyphenyl)-4H-chromen-4-one對照藥材 分 子 式: C17H14O5 分 子 量: 298.29006
GCOM1 GCOM1蛋白抗體澤瀉醇 E 23-醋酸酯Alisol E 23-acetate化學標準品 分 子 式: 分 子 量:
OGFOD2 末端多聚腺苷酸2蛋白抗體D-山梨醇(2R,3R,4R,5S)-Hexane-1,2,3,4,5,6-hexaol中藥標準品 分 子 式: C6H14O6 分 子 量: 182.17176