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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
牛鼻病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3743
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3743
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

牛鼻病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus(IBRV)

LZR3743

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

*勝利油田熱甲烷微球菌Monkey HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Methermicoccus shengliensis

黑曲霉Monkey PRKG1 (Protein Kinase, cGMP Dependent Type I) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  niger

異配囊接霉Monkey GLTP (Glycolipid Transfer Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor heterogamus

熱帶鹽水孢菌Monkey PLN (Phospholamban) ELISA Kit拉丁屬名: Salinispora tropica

大腸桿菌Monkey CA12 (Carbonic Anhydrase XII) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Wautersiella falseniiMonkey α-SCA (α-sarcomeric Actin) ELISA Kit拉丁屬名: Wautersiella falsenii

假單胞菌Monkey SAA2 (Serum Amyloid A2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas vranovensis

新月彎孢霉Monkey AGRN (Agrin) ELISA Kit拉丁屬名: Cochliobolus lunatus

橡膠樹假絲酵母Monkey TACR2 (Tachykinin Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida heveicola

水生黃桿菌Monkey GREM1 (Gremlin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium hydatis

日本根霉Monkey Try2 (Trypsinogen II) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus japonicus

嗜熱鏈球菌Monkey MX1 (Myxovirus Resistance 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus  thermophilus

多主葡萄殼菌Monkey HSP-70/HSPA9 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

海泥黃桿菌Monkey LAT (Linker For Activation of T-cell) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium  oceanosedimentum

粗皮側耳(平菇)Monkey IκBβ (Inhibitory Subunit of NF Kappa B Beta) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
牛鼻病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書DPP9/DPRP2  二肽基肽酶9抗體竹紅菌丙素1H-Cyclohepta[ghi]perylene-6,11-dione,3-acetyl-5,12-dihydroxy-4,8,9,13-tetramethoxy-2-methyl- (9CI)化學標準品 分 子 式: C30H24O9 分 子 量:

DPP8/DPRP1  二肽基肽酶8抗體連翹脂素Phenol,4-[(1S,3aR,4R,6aR)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)tetrahydro-1H,3H-furo[3,4-c]furan-1-yl]-2-methoxy- 中藥標準品  分 子 式: C21H24O6 分 子 量:

Matriptase 2  膜型絲氨酸蛋白酶2抗體野菊花內酯Yejuhualactone中藥標準品  分 子 式: C32H40O8 分 子 量: 552.6552

CYBR1  細胞色素B還原酶1抗體氯化鋰溶液(1mol/L,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

UQCRC1  輔酶細胞色素C還原酶核心蛋白1抗體番瀉苷CSennoside C中藥標準品  分 子 式: C42H40O19 分 子 量: 848.755600000001

TXNRD1  硫氧環蛋白還原酶1抗體蛋白快速銀染試劑盒標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PRDX2/Peroxiredoxin-SO3  硫氧還蛋白過氧化物酶2碳酸氫鈉溶液(7.4%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量: 


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