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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3754
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3754 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Klebsiella pnenmoniae | LZR3754 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
靈芝Monkey PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球芽孢桿菌Monkey ANGPTL6 (Angiopoietin Like Protein 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus globigii
彎孢菌Monkey CNR1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit 用途: 研究
解淀粉芽孢桿菌Monkey CD4 (Cluster of Differentiation 4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens
灰黃青霉Monkey Pax (Paxillin) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium griseofulvum
云南假諾卡氏菌Monkey TPP (Thrombus Precursor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudonocardia yunnanensis
琥珀乳牛肝菌Monkey CLDN1 (Claudin 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
細刺囊殼Monkey PLSCR1 (Phospholipid Scramblase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ascotricha pusilla
微小鏈霉菌Monkey KNG1 (Kininogen 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces parvulus
季也蒙假絲酵母Monkey TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Candida guilliermondii
球毛殼菌（可訂購）Monkey CX40 (Connexin 40) ELISA Kit 用途: 代謝產(chǎn)物
煙色小菌核鏈霉菌Monkey PTX 3/TSG-14 (Pentraxin 3, Long) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces fumigatiscleroticus
孟氏假單胞菌Monkey SSTR1 (Somatostatin Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
假單胞菌Monkey Grb14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas arsenicoxydans
草木樨中華根瘤菌Monkey SCG2 (Secretogranin II) ELISA Kit用途: 固氮
克雷伯菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格UFC1 泛素結(jié)合酶UFC1抗體紫丹參素Cprzewaquinone C化學(xué)標準品 分 子 式: 分 子 量:
UBCH6/UBE2E1 泛素蛋白連接酶E1抗體續(xù)隨二萜醇中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
UBC6e/UBE2J1 泛素結(jié)合酶E2J1抗體3,5-二氯苯酚3,5-Dichlorophenol化學(xué)標準品 分 子 式: C6H4OCl2 分 子 量: 163.00136
UBE2A/UBE2B/RAD6 泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體蕓苔素內(nèi)酯epibrassinolide中藥標準品 分 子 式: C28H48O6 分 子 量: 480.67712
RNF160/ZNF294 環(huán)指蛋白160抗體肉蓯蓉苷ACistanoside A中藥標準品 分 子 式: C36H48O20 分 子 量: 800.75
NFX1 核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體胡薄荷酮Menthone中藥標準品 分 子 式: C10H18O 分 子 量: 154.25
NCE2 泛素結(jié)合酶E2F抗體山麥冬皂苷BLiriopesides B中藥標準品 分 子 式: C39H62O12 分 子 量: 722.90238
