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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
人病毒58探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3725
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3725
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

人病毒58探針法熒光定量PCR試劑盒

Human Papillomavirus 58(HPV-58)

LZR3725

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

微桿菌屬Monkey CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium  sp.

林生畢赤酵母Monkey FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia silvicola

茯苓ZMonkey BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

木豆根瘤菌Monkey sTfR1 (Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

小葉相思根瘤菌Monkey FABP6 (Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium sp.

束型青霉Monkey CKLFSF5 (Chemokine Like Factor Superfamily 5) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium isariiforme

天津李時(shí)珍氏菌Monkey MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Lishizhenia tianjinensis

金格桿菌Monkey RCOR3 (Rest Corepressor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Kingella kingae

橄欖色硬膜鏈霉菌Monkey D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces olivaceiscleroticus

粉樹孢Monkey LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

Sphingomonas panni Monkey GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

魯氏接合酵母Monkey PRDX5 (Peroxiredoxin 5) ELISA Kit拉丁屬名: Zygosaccharomyces  rouxii

雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)Monkey VCL (Vinculin) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer

漢遜德巴利酵母Monkey STAT4 (Signal Transducer and Activator of Transcription 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Debaryomyces  hansenii

蘇云金芽胞桿菌熊本亞種Monkey MYCBP (C-Myc Binding Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
人病毒58探針法熒光定量PCR試劑盒 phospho-Eg5(Tyr92)  磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體西米杜鵑醇A'-Neo-25,26,28-trinorgammacer-5-en-3-ol,9,13,17-trimethyl-, (3b,8b,9a,10a,13b,14a,17a,18b)-對(duì)照藥材 分 子 式: C30H50O 分 子 量: 426.7174

COMMD9  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體諾米林Nomilin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C28H34O9 分 子 量: 514.57

COMMD10  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體雷公藤定堿8,11-Epoxy-9,12-ethano-11,15-methano-5H,11H-[1,9]dioxacyclooctadecino[4,3-b]pyridine-5,17(18H)-dione,10,13,22,23-tetrakis(acetyloxy)-12-[(acetyloxy)methyl]-14-(benzoyloxy)-7,8,9,10,12,13,14,15,19,20-decahydro-18,21-dihydroxy-8,18,21-trimethyl-,(8R,9R,10R,11S,12S,13R,14R,15S,21S,22S,23R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C43H49NO19 分 子 量: 883.844460000001

COMMD8  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體甘松新酮5H-Naphtho[2,1-c][1,2]dioxol-5-one,1,3a,4,7,8,9,9a,9b-octahydro-1,1,9,9a-tetramethyl-, (3aR,9R,9aR,9bS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C15H22O3 分 子 量: 250.33338

COMMD3  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體間羥基苯乙酸3-Hydroxyphenylacetic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C8H8O3 分 子 量: 152.14732

COMTD1/AVSD2  富含半胱氨酸與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體鹽酸水蘇堿Stachydrine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C7H14NO2+.Cl- 分 子 量: 179.64456

CRELD2  富含半胱氨酸與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體人參皂苷Rcginsenoside rc中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C53H90O22 分 子 量: 1079.27

 


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