- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3725
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3725 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人病毒58探針法熒光定量PCR試劑盒 | Human Papillomavirus 58(HPV-58) | LZR3725 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
微桿菌屬Monkey CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium sp.
林生畢赤酵母Monkey FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia silvicola
茯苓ZMonkey BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
木豆根瘤菌Monkey sTfR1 (Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
小葉相思根瘤菌Monkey FABP6 (Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium sp.
束型青霉Monkey CKLFSF5 (Chemokine Like Factor Superfamily 5) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium isariiforme
天津李時(shí)珍氏菌Monkey MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Lishizhenia tianjinensis
金格桿菌Monkey RCOR3 (Rest Corepressor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Kingella kingae
橄欖色硬膜鏈霉菌Monkey D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces olivaceiscleroticus
粉樹孢Monkey LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
Sphingomonas panni Monkey GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
魯氏接合酵母Monkey PRDX5 (Peroxiredoxin 5) ELISA Kit拉丁屬名: Zygosaccharomyces rouxii
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)Monkey VCL (Vinculin) ELISA Kit拉丁屬名: Agaricus bisporus (Lange) Singer
漢遜德巴利酵母Monkey STAT4 (Signal Transducer and Activator of Transcription 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Debaryomyces hansenii
蘇云金芽胞桿菌熊本亞種Monkey MYCBP (C-Myc Binding Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
人病毒58探針法熒光定量PCR試劑盒 phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體西米杜鵑醇A'-Neo-25,26,28-trinorgammacer-5-en-3-ol,9,13,17-trimethyl-, (3b,8b,9a,10a,13b,14a,17a,18b)-對(duì)照藥材 分 子 式: C30H50O 分 子 量: 426.7174
COMMD9 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體諾米林Nomilin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C28H34O9 分 子 量: 514.57
COMMD10 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體雷公藤定堿8,11-Epoxy-9,12-ethano-11,15-methano-5H,11H-[1,9]dioxacyclooctadecino[4,3-b]pyridine-5,17(18H)-dione,10,13,22,23-tetrakis(acetyloxy)-12-[(acetyloxy)methyl]-14-(benzoyloxy)-7,8,9,10,12,13,14,15,19,20-decahydro-18,21-dihydroxy-8,18,21-trimethyl-,(8R,9R,10R,11S,12S,13R,14R,15S,21S,22S,23R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C43H49NO19 分 子 量: 883.844460000001
COMMD8 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體甘松新酮5H-Naphtho[2,1-c][1,2]dioxol-5-one,1,3a,4,7,8,9,9a,9b-octahydro-1,1,9,9a-tetramethyl-, (3aR,9R,9aR,9bS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22O3 分 子 量: 250.33338
COMMD3 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體間羥基苯乙酸3-Hydroxyphenylacetic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C8H8O3 分 子 量: 152.14732
COMTD1/AVSD2 富含半胱氨酸與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體鹽酸水蘇堿Stachydrine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H14NO2+.Cl- 分 子 量: 179.64456
CRELD2 富含半胱氨酸與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體人參皂苷Rcginsenoside rc中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C53H90O22 分 子 量: 1079.27