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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3665
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3665 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Haemophilus paragallinarum | LZR3665 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
突孢毛殼Monkey GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium murorum
產(chǎn)黃青霉Monkey sAC (Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit用途: 教學科研
大腸埃希菌Monkey TWEAK (Tumour Necrosis Factor Related Weak Inducer of Apoptosis) ELISA Kit拉丁屬名: coli
季也蒙假絲酵母Monkey EloA (Elongin A) ELISA Kit拉丁屬名: Candida guilliermondii
巴西果小克銀漢霉Monkey IL-2Rα (Interleukin 2 Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Cunninghamella bertholletiae
Pseudomonas tremaeMonkey NUP214 (Nucleoporin 214kDa) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
吉氏根瘤菌Monkey MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium giardinii
洋蔥伯克霍爾德氏菌Monkey NAGase (N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Burkholderia cepacia
出芽短梗霉Monkey MAU (Microalbuminuria) ELISA Kit拉丁屬名: Aureobasidium pullulans
異常威克漢姆酵母Monkey I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
大腸埃希氏菌Monkey CCP (Complement Control Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
黑曲霉Monkey MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
CystofilobasidiumMonkey TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Cystofilobasidium capitatum
黑曲霉Monkey TG (Thyroglobulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
球孢白僵菌Monkey αMSH (Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治
副雞嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 RACGAP1 Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體金胺-酚染色液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
phospho-RACGAP1(Ser387) 磷酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體高三尖杉酯堿homoharringtonine中藥標準品 分 子 式: C29H39NO9 分 子 量: 545.63
RCC2 染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體α-倒捻子素1,3,6-Trihydroxy-7-methoxy-2,8-bis(3-methylbut-2-en-1-yl)-9H-xanthen-9-one化學標準品 分 子 式: C24H26O6 分 子 量: 410.45964
SEPT1 細胞分化蛋白SEP1抗體多烯紫杉醇Taxotere中藥標準品 分 子 式: C43H53NO14 分 子 量: 807.88
SEPT10 細胞分化蛋白SEPT10抗體2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,16,19-貝殼杉烯三醇2,16,19-Kauranetriol 2-O-beta-D-allopyranoside對照藥材 分 子 式: C26H44O8 分 子 量: 484.62276
SEPT12 細胞分化蛋白SEPT12抗體氨水溶液(0.3%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
SEPT14 細胞分化蛋白SEPT14抗體軟骨素硫酸鈉鹽Chondroitin sulfate sodium salt化學標準品 分 子 式: C14H22NO16S-.Na+ 分 子 量: 515.37638
