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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3710
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3710 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人病毒4型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Human Herpesvirus 4 (HHV-4，EB) )4 | LZR3710 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
產(chǎn)氨短桿菌Monkey HBF (Fetal Hemoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacterium ammoniagenes
Monkey CA724 (Tumor Marker CA724) ELISA Kit用途: 益生菌
華特拉根瘤菌Monkey SIGLEC2 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
芽胞桿菌Monkey UBE1L (Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蠟樣芽孢桿菌Monkey MFG-E8 (Milk Fat Globule EGF Factor 8) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
馬泰勒蟲（青海剛察株）Monkey NPY (Neuropeptide Y) ELISA Kit拉丁屬名: equi
枯草芽孢桿菌Monkey SM/SPH (Sphingomyelin) ELISA Kit用途: 昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)污染防治研究
牛瘟病毒Monkey MT (Melatonin) ELISA Kit拉丁屬名: Rinderpest virus
副結(jié)核補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（-）陰性血清Monkey RETN (Resistin) ELISA Kit 規(guī)格: 1ml
土壤短芽胞桿菌Monkey MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 用途: 分類 研究
琥珀乳牛肝菌Monkey PⅢCP (Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希菌Monkey PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
干酪乳桿菌Monkey GSTs (Glutathione S-Transferases) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus casei
貝萊斯芽胞桿菌Monkey NUP205 (Nucleoporin 205kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus velezensis
灰離褶傘Monkey fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
人病毒4型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ARRDC4 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體焦性沒食子酸Benzene-1,2,3-triol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H6O3 分 子 量: 126.11004
CCDC134 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體二羥丙茶堿B(細(xì)胞毒素)3H-1,2-Dioxepin-5-carboxaldehyde,7-(decahydro-5,5,8a-trimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl)-4,7-dihydro-3-hydroxy-對照藥材 分 子 式: C20H30O4 分 子 量:
CCDC58 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58抗體山奈酚-3-O-(6''-O-順-香豆酰基)葡萄糖苷Kaempferol-3-O-(6''-O-cis-coumaryl)glucoside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
β-Amyloid(1-42) β淀粉樣肽（1-42）抗體掌葉防已堿2,3,9,10-TETRAMETHOXY-5,6-DIHYDRO-ISOQUINO[3,2-A]ISOQUINOLINYLIUM中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H22NO4 分 子 量: 352.4
CCDC94 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體Acr-Bis(40%,29:1)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CCDC135 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體桑辛素morusin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H24O6 分 子 量: 420.459
CCDC124 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體高良姜素 3-O-甲醚4H-1-Benzopyran-4-one,5,7-dihydroxy-3-methoxy-2-phenyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12O5 分 子 量: 284.26348
