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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
病毒通用型探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3689
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3689
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

病毒通用型探針法熒光定量PCR試劑盒

Hepatitis B Virus(HBV)

LZR3689


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

赭鱗蘑菇Monkey S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit用途: 可食、藥菌

產氣腸桿菌Monkey ICAM-4 (Intercellular Adhesion Molecule-4) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter aerogenes

簇生黃韌傘Monkey EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

粉紅單端孢Monkey PSA/KLK3 (Prostate Specific Antigen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

灰樹花Monkey CX26 (Connexin 26) ELISA Kit 用途: 食用菌

大腸埃希氏桿菌Monkey P-CK (Pan-Cytokeratin) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli

華麗側耳(佛羅里達側耳)Monkey C/EBPδ (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Delta) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus floridanus

蘑菇Monkey MCSFR (Macrophage Colony Stimulating Factor Receptor) ELISA Kit用途: 食用

紅冬孢酵母Monkey CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodosporidium toruloides

 寇氏隱甲藻Monkey OBTF4 (Octamer Binding Transcription Factor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Crypthecodinium cohnii

三葉草根瘤菌Monkey NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2 ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大腸埃希氏菌Monkey PCDH15 (Protocadherin 15) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

靈芝Monkey SIGLEC1 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

腸膜明串珠菌Monkey DAP6 (Death Associated Protein 6) ELISA Kit拉丁屬名: Leuconostoc mesenteroides

假單胞菌Monkey VIM (Vimentin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas yamanorum
病毒通用型探針法熒光定量PCR試劑盒 TBRG4  轉化生長因子β調節蛋白4抗體偽石蒜堿1H-Pyrrolo[3,2,1-de]phenanthridine-1,2,10-triol,2,4,5,7,11b,11c-hexahydro-9-methoxy-, (1S,2S,11bS,11cS)-化學標準品 分 子 式: C16H19NO4 分 子 量:

TLK2  絲氨酸/蘇氨酸激酶TLK2抗體木蘭脂素Magnoline中藥標準品  分 子 式: C36H40N2O6 分 子 量:

ANKRD28  錨蛋白重復域28抗體前胡香豆素E2-Butenoic acid,2-methyl-,(9R)-9,10-dihydro-8,8-dimethyl-2,10-dioxo-2H,8H-benzo[1,2-b:3,4-b']dipyran-9-ylester, (2E)- (9CI)化學標準品 分 子 式: C19H18O6 分 子 量:

SIPA1L2  信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2抗體西紅柿堿Tomatine中藥標準品  分 子 式: C50H83NO21 分 子 量: 1034.18812

DUSP7  雙特異性蛋白磷酸酶7抗體補骨脂香豆素AFicusin A對照藥材 分 子 式: C25H24O5 分 子 量: 404.45506

PPM1B  蛋白質磷酸酶1B抗體(PP2Cβ)western轉移緩沖液(5×,尼龍膜)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

PPM1G  蛋白質磷酸酶1G抗體(PP2Cγ)北美芹素2-Butenoic acid,2-methyl-,(9R,10R)-9-(acetyloxy)-9,10-dihydro-8,8-dimethyl-2-oxo-2H,8H-benzo[1,2-b:3,4-b']dipyran-10-ylester, (2Z)-中藥標準品  分 子 式: C21H22O7 分 子 量: 386.39518

 


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