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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
病毒前基因組探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3679
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3679
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

病毒前基因組探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Hepatitis B Virus Pregenomic RNA(HBV pgRNA)RNA

LZR3679

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

炭黑曲霉Monkey FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  carbonarius

褪色沙雷氏菌(粘質沙雷氏菌)Monkey PK2 (Prokineticin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Serratia marcescens

相思根瘤菌Monkey CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鴨疫里氏桿菌Monkey c-myc (c-myc Oncogene Product) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer

黃桿菌Monkey STK39 (Serine/Threonine Kinase 39) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium piscis

釀酒酵母Monkey PDGF (Platelet-Derived Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

鴨疫里氏桿菌Monkey Pg (Progesterone) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer

異常漢遜酵母異常變種Monkey TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Hansenula  anomala var. anomala

擲孢酵母Monkey EPCR (Endothelial Protein C Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

卷柄根霉Monkey PYGB (Glycogen Phosphorylase, Brain ) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus circinans

枯草芽孢桿菌Monkey GSTα5 (Glutathione S Transferase Alpha 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

腫痂鏈霉菌Monkey ALDH (Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces turgidiscabies

奧氏蜜環菌Monkey HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

克雷伯氏菌Monkey GPC2 (Glypican 2) ELISA Kit 規格: 凍干粉

黑曲霉Monkey CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  niger
病毒前基因組探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ALOXE3  表皮型脂氧合酶3抗體(相關蛋白)圓葉腫柄菊素 FPropanoic acid,2-methyl-,(3aR,4R,6R,9R,10Z,11aR)-2,3,3a,4,5,6,9,11a-octahydro-9-hydroxy-6,10-dimethyl-3-methylene-2-oxo-6,9-epoxycyclodeca[b]furan-4-ylester對照藥材 分 子 式: C19H24O6 分 子 量: 348.39026

ALPK3  α蛋白激酶3抗體(心肌)D-松醇D-Pinitol中藥標準品  分 子 式: C7H14O6 分 子 量: 194.18246

CEND1  細胞周期通道和神經細胞分化蛋白1抗體西瑞香素Daphnoretin中藥標準品  分 子 式: C19H12O7 分 子 量:

DHRS9  短鏈脫氫酶/還原酶家族9抗體別隱品堿ALLOCRYPTOPINE中藥標準品  分 子 式: C21H23NO5 分 子 量: 369.41

DLL3  Notch信號通路Delta樣配體3抗體龍血素ALoureirin A中藥標準品  分 子 式: C17H18O4 分 子 量: 286.325

EME1  減數分裂內切酶EME1抗體姜狀三七苷R13β-[(2-O-β-D-Glucopyranosyl-β-D-glucopyranuronosyl)oxy]oleana-12-ene-28-oic acid化學標準品 分 子 式: C42H66O14 分 子 量: 794.96504

FAM3C/ILEI  上皮分泌型FAM3C蛋白抗體硫酸軟骨素Chondroitin Sulphate中藥標準品  分 子 式: (C14H21NO14S)N 分 子 量:

 


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