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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

枯草芽孢桿菌Monkey PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

漢遜德巴利酵母Monkey OJ/IleRS (Anti-OJ-Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Debaryomyces hansenii

芽孢桿菌Monkey COL3α1 (Collagen Type III Alpha 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.

毛栓孔菌Monkey PR3 (Proteinase 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型Monkey MEPE (Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

滑菇Monkey CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

產(chǎn)黃青霉Monkey FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium chrysogenum

蠟樣芽孢桿菌Monkey Anti-GM1 (Anti-Ganglioside M1 Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

彎孢菌Monkey NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4) ELISA Kit用途: 研究

云芝Monkey POMC (Pro-Opiomelanocortin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

短桿菌Monkey DPYSL3 (Dihydropyrimidinase Like Protein 3) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacterium  sp.

CystofilobasidiumMonkey ATF-4 (Activating Transcription Factor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Cystofilobasidium  capitatum

致病擬桿菌Monkey ConA (Concanavalin A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacteroides acidifaciens

糞腸球菌Monkey EPOR (Erythropoietin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: faecalis

枯草芽孢桿菌Monkey PROS (Protein S) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
沿岸單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-PRKAB1(Ser182)  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體五脂素A11(2H)-Naphthalenone,3,4-dihydro-7-hydroxy-4-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-6-methoxy-2,3-dimethyl-,(2S,3S,4R)-化學標準品 分 子 式: C20H22O5 分 子 量:

AMPK gamma 1  腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體甲基原薯蕷皂苷Methylprotodioscin中藥標準品  分 子 式: C52H86O22 分 子 量: 1063.23

KLHDC5  kelch樣蛋白5抗體PBS-BSA溶液(0.1%BSA)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-C-Myc(Thr358)  磷酸化致癌基因C-Myc抗體鹽酸土霉素溶液(Oxytetracycline,50mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

phospho-C-Myc(Thr373)  磷酸化致癌基因C-Myc抗體麗春紅S染色儲存液(10×Ponceau S)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

KLHL22  Kelch樣蛋白22抗體維生素A醋酸酯Retinol acetate中藥標準品  分 子 式: C22H32O2 分 子 量: 328.49

KNTC1/Kinetochore  著絲點關(guān)聯(lián)蛋白1抗體豆甾烷-3，6-二酮Stigmastane-3,6-dione對照藥材 分 子 式: C29H48O2 分 子 量: 428.69022