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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3652
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3652 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鵝細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Goose Parvoiruvs(GPV) | LZR3652 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
陰溝腸桿菌Monkey GMP-140 (Alpha-granular Membrane Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter cloacae
枯草芽孢桿菌Monkey DAG1 (Dystrophin Associated Glycoprotein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
漢塔成對桿菌Monkey PAEP (Progestagen-Associated Endometrial Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Dyadobacter hamtensis
紡錘狀鏈霉菌Monkey LDH (Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces netropsis
稻平臍蠕孢Monkey CX37 (Connexin 37) ELISA Kit 拉丁屬名: Bipolaris oryzae
貝酵母Monkey C/EBPε (CCAAT/Enhancer Binding Protein, Epsilon) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces bayanus
伯克霍爾德氏菌屬Monkey MAP2K6/MKK6 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 6) ELISA Kit拉丁屬名: Burkholderia sp.
釀酒酵母Monkey PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Monkey γGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
厚孢根霉Monkey AP (Allopregnanolone) ELISA Kit用途: 產(chǎn)延胡索酸
枯草芽孢桿菌Monkey CYB561 (Cytochrome b-561) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
HymenobacterMonkey SSRP1 (Structure Specific Recognition Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Hymenobacter sp.
瑞士乳桿菌Monkey Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus helveticus
豇豆慢生根瘤菌Monkey ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit用途: 與綠葉、銀葉山螞蝗共生固氮
釀酒酵母Monkey THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
鵝細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商LAP3 亮氨酸氨基肽酶3抗體D-酒石酸(2S,3S)-2,3-Dihydroxysuccinic acid中藥標準品 分 子 式: C4H6O6 分 子 量: 150.08684
LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生長促進因子抗體（激肽原1）青藤堿Sinomenine中藥標準品 分 子 式: C19H23NO4 分 子 量: 329.39
KCNMB1/Maxi Potassium channel beta 鈣激活鉀通道蛋白β1抗體莪術(shù)烯醇Curcumenol中藥標準品 分 子 式: C15H22O2 分 子 量: 234.33398
P2RX4 三磷酸腺苷門控陽離子通道蛋白抗體枸櫞酸血根堿中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
ATP6IP2 ATP酶H+轉(zhuǎn)運溶酶體輔助蛋白2抗體pH標準緩沖溶液(pH=6.86)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗體環(huán)桑色烯Cyclomulberrochromene對照藥材 分 子 式: C25H22O6 分 子 量: 418.43858
Renalase 腎胺酶抗體鴉膽亭Bruceantin化學(xué)標準品 分 子 式: C28H36O11 分 子 量: 548.57884
