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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3656
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3656 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
三代蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Gyrodactylus salaris | LZR3656 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
鏈霉菌Monkey cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit用途: 具有一定殺蟲(chóng)活性。
根瘤桿菌屬Monkey NF (Neurofilament) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobacter? dauci
米曲霉Monkey VEGFR-2/KDR (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
薩氏艾美耳球蟲(chóng)Monkey AGA (Anti-Gliadin Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: saitamae
平菇Monkey IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
不解糖鞘氨單胞菌Monkey STAT6B (Signal Transducer and Activator of Transcription 6B) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas asaccharolytica
擴(kuò)展青霉Monkey C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
斐濟(jì)球腔菌Monkey EFNA3 (Ephrin A3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鼠李糖乳桿菌Monkey NAGLU (N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus
紅色紅曲Monkey SPOP (Speckle Type POZ Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus ruber
阿穆?tīng)査箍藶雏}地桿菌Monkey MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium amurskyense
柴油食烷菌Monkey CDK8 (Cyclin Dependent Kinase 8) ELISA Kit拉丁屬名: Alcanivorax dieselolei
金孢霉屬Monkey EFNA5 (Ephrin A5) ELISA Kit 拉丁屬名: Geomyces sp.
淺紫灰直絲鏈霉菌Monkey TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces lavendularectus
枯草芽孢桿菌枯草亞種Monkey TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. spizizenii
三代蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商CENPP 著絲粒蛋白P抗體表莪術(shù)呋喃烯酮Epicurzerenon化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H18O2 分 子 量: 230.302
PCNT/Pericentrin 中心粒周蛋白抗體過(guò)氧麥角甾醇Ergosta-6,22-dien-3-ol,5,8-epidioxy-, (3b,*,8a,22E)-對(duì)照藥材 分 子 式: C28H44O3 分 子 量:
Importin4/RanBP4 核蛋白4抗體（Ran結(jié)合蛋白4）柚皮苷二氫查爾酮Naringin dihydrochalcone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H34O14 分 子 量: 582.56
MIS12 染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體蓽茇酰胺piperlongumine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H19NO5 分 子 量: 317.33646
CDCA1/Nuf2 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白1抗體七葉皂苷Bβ-d-Glucopyranosiduronic acid, [3β,16α,21β(Z),22α]-22-(acetyloxy)-16,24,28-trihydroxy-21-[(2-methyl-1-oxo-2-butenyl)oxy]olean-12-en-3-yl O-β-d-glucopyranosyl-(1→2)-O-[β-d-glucopyranosyl-(1→4)]-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C55H86O24 分 子 量: 1133.27
Importin 9/RanBP9 核蛋白9抗體（Ran結(jié)合蛋白M）鹽膚木內(nèi)酯 ARhuscholide A對(duì)照藥材 分 子 式: C31H42O3 分 子 量: 462.66338
SPC25 紡錘體極點(diǎn)構(gòu)成蛋白25抗體葫蘆素IIACucurbitacin A化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H50O8 分 子 量: 562.7346
