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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3650
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3650 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
山羊痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Goatpox Virus(GTPV) | LZR3650 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
猴頭菌Monkey MLZE (Melanoma Derived Leucine Zipper Extra Nuclear Factor) ELISA Kit用途: 食用兼藥用
鐮刀菌Monkey RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
草酸青霉Monkey E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium oxalicum
冠突曲霉Monkey Lptn/XCL1 (Lymphotactin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus cristatus
埃切假絲酵母Monkey TARS (Threonyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit拉丁屬名: Candida etchellsii
釀酒酵母Monkey AT (AntiThrombin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
乳菇屬Monkey NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit用途: 屬外生菌根菌
泌液克里格范瑞吉酵母Monkey CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit拉丁屬名: Kregervanrija fluxuum
大櫻桃葉穿孔病*Monkey FOXP3 (Forkhead Box Protein P3) ELISA Kit 拉丁屬名: Xanthomonas pruni
頭狀絲孢酵母Monkey F5 (Coagulation Factor V) ELISA Kit用途: 產(chǎn)脂肪酶
膠孢鐮孢Monkey PKCδ1 (Protein Kinase C Delta ) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium subglutinans
淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種Monkey IL-19 (Interleukin 19) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces lavendulae var. chromogenes
醬油曲霉Monkey GLRX3 (Glutaredoxin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus sojae
雜色曲霉Monkey PIINP (Procollagen II N-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豬絲菌Monkey NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 拉丁屬名: rhuriopathiae
山羊痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格NRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體磺胺苯甲酰sulconazole nitrate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C13H12N2O3S 分 子 量: 276.31
PGRPS 肽聚糖識(shí)別蛋白1抗體草夾竹桃苷Androsin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H20O8 分 子 量: 328.3145
Porimin 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體異補(bǔ)骨脂查爾酮2-Propen-1-one,1-[2,4-dihydroxy-3-(3-methyl-2-butenyl)phenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)-, (2E)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20O4 分 子 量:
TRAF7 受體相關(guān)因子7抗體6,8-二異戊二烯基柚皮素senegalensin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
ZDHHC16 細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體焦地黃苯乙醇甙B1b-D-Glucopyranoside,2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethyl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®3)-O-[b-D-galactopyranosyl-(1®6)]-, 4-[(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-propenoate]化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C37H50O20 分 子 量: 814.780900000001
DR6/CD358 細(xì)胞調(diào)亡素/受體死亡受體6抗體睪酮Testosterone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H28O2 分 子 量: 288.43
BCCIP/TOK1 易感基因2和p21蛋白抑制因子抗體白花前胡甲素Praeruptorin A中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: HNO3- 分 子 量: 63.01284
