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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

費爾氏酵母GDF7 (Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Fellomyces borneensis

釀酒酵母Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大毛霉GA (Glycated Albumin) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor mucedo

稻田彎曲嗜酸菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces mauvecolor

朱黃籃狀菌ENG/CD105 (Endoglin) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces minioluteus

膠孢CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

小孢根霉須狀變種AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. rhizopodiformis

假單胞菌屬L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  reinekei

新城疫病毒CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle       disease virus

核盤菌GADL1 (Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

芽胞桿菌GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

溶淀粉類芽孢桿菌OC/BGP (Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus amylolyticus

岸邊亞硫酸鹽桿菌DβH (Dopamine-β-Hydroxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Sulfitobacter litoralis

樟疫霉MDC/CCL22 (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

深層大洋芽孢桿菌Preptin ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus profundus
禽病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書SPHK2  鞘氨醇激酶2抗體銀線草內酯醇Naphtho[2,3-b]furan-2(4H)-one,4a,5,6,7,8,8ahexahydro- 5-hydroxy-3,5,8a-trimethyl-,(4aR,5R,8aR)- 化學標準品 分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.3175

STK3  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶3抗體康普瑞汀COMBRETASTATIN A-4中藥標準品  分 子 式: C18H20O5 分 子 量: 316.3484

IKIP  IKK激酶相互作用蛋白抗體新比克白芷內酯7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-[(2- hydroxy-3-methyl-3-butenyl)oxy]-4- methoxy-,(-)- 對照藥材 分 子 式: C17H16O6 分 子 量: 316.30534

AMACR/P504S  α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗體10-硝基喜樹堿RUBITECAN化學標準品 分 子 式: C20H15N3O6 分 子 量: 393.35

CASC3/MLN51  易感候選基因3抗體去氫毛鉤藤堿methyl (3beta,16E)-16-(methoxymethylidene)coryn-18-en-17-oate中藥標準品  分 子 式: C22H26N2O3 分 子 量: 366.45344

phospho-IKKi/IKKe(Thr500)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體PBST(1 pH7.4)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TIAF1  TGFB1誘導抗凋亡因子1抗體澤渥萜A'-Neogammacerane-6,22-diol,(6a)-化學標準品 分 子 式: C30H52O2 分 子 量: 444.73268