產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3638 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規格 | Gallid Herpesvirus | LZR3638 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
釀酒酵母BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
塔賓曲霉ECE1 (Endothelin Converting Enzyme 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
微黃大洋芽孢桿菌AMPK (Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus luteolus
戈登氏菌屬CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit拉丁屬名: Gordonia sp.
灰樹花2號MUC4 (Mucin 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
馬賽菌NUMA1 (Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia eurypsychrophila
花楸盤多毛孢SOX1 (Sex Determining Region Y Box Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
Pseudomonas koreensis Kwon et al. MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蠟樣芽孢桿菌ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus cereus
巴斯德駒形氏酵母5-HIAA (5-Hydroxyindolacetic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Komagataella pastoris
巴西果小克銀漢霉RELB (V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella bertholletiae
根瘤菌VacA (Vacuolating Cytotoxin A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
綠毛殼擬毛梭孢變種F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium virescens var. thielavioideum
枯草芽孢桿菌IDUα (Alpha-L-Iduronidase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
禽病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規格Blood Group Lewis a 血型Lewis a抗體PIPES緩沖液(10mmol/L,pH6.8)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
DARC/CD234 Duffy血型趨化因子受體抗體查斯馬寧Chasmanine中藥標準品 分 子 式: C25H41NO6 分 子 量: 451.59614
Galactosidase alpha α-半乳糖苷酶抗體甲基 3-O-阿魏酰奎尼酸酯Methyl 3-O-feruloylquinate化學標準品 分 子 式: 分 子 量:
Ankyrin erythroid 紅細胞蛋白Ank1抗體大豆皂苷Be甲酯中藥標準品 分 子 式: 分 子 量:
PPM1F 鈣調蛋白依賴性蛋白激酶磷酸酶抗體5-O-甲基維斯阿米醇苷4'-O-beta-D-Glucosyl-5-O-methylvisamminol中藥標準品 分 子 式: C22H28O10 分 子 量: 452.45172
RIP3 受體結合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體桔梗皂苷DPlatycodin D中藥標準品 分 子 式: C57H92O28 分 子 量: 1225.33
RIP5/RIPK5 受體結合絲氨酸蘇氨酸激酶5抗體Gendre固定液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: