- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3637
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3637 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
禽病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 | Gallid Herpesvirus | LZR3637 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
冷溫木拉克酵母HHIP (Hedgehog Interacting Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Mrakia frigida
泗川假黃單胞菌α-La (Alpha-Lactalbumin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudoxanthomonas sacheonensis
枯草芽孢桿菌MF/MPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
堅強芽孢桿菌FOXO3 (Forkhead Box Protein O3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
植物乳桿菌PLVAP (Plasmalemma Vesicle Associated Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
炭球菌Gal (α-Galactoyl) ELISA Kit拉丁屬名: Dildinia concentrica (Bolt.: Fr.) Ces&de Not
固氮假單胞菌PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas azotoformans
釀酒酵母Tn-T (Troponin T) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
地衣芽孢桿菌HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus licheniformis
糞產(chǎn)堿桿菌PRB1 (Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes faecalis
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)*AFP-L3 (Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
芽胞桿菌PGDS (Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
格氏糖多孢菌PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharopolyspora gregorii
白僵菌EP3 (Prostaglandin E Receptor 3) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治
枯草芽孢桿菌SBEM (Small Breast Epithelial Mucin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
禽病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein Bcl2樣凋亡蛋白13抗體商陸皂甙 BOlean-12-ene-28,29-dioicacid, 2,23-dihydroxy-3-(b-D-xylopyranosyloxy)-, 29-methyl ester, (2b,3b,4a,20b)-對照藥材 分 子 式: C36H56O11 分 子 量: 664.82324
Bcl G/BCL2 like 14 Bcl2樣凋亡蛋白14抗體DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
BOK/Bcl 2 like protein 9 Bcl2樣凋亡蛋白9抗體川續(xù)斷皂苷乙Dipsacoside B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C53H86O22 分 子 量: 1075.24
Bmf/Bcl2 modifying factor Bcl2蛋白修飾因子抗體川芎嗪2,3,5,6-Tetramethylpyrazine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C8H12N2 分 子 量: 136.19428
A4GALT/CD77 α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1蘇丹紅ⅢSudan Ⅲ中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H16N4O 分 子 量: 352.38864
Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體米那普侖鹽酸鹽Cyclopropanecarboxamide,2-(aminomethyl)-N,N-diethyl-1-phenyl-, (1R,2S)-rel-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H22N2O 分 子 量: 246.34798
Blood Group Kell Antigen/CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體Rossman固定液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: