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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
埃希氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3590
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3590
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

埃希氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格

Escherichia spp.

LZR3590

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

Fusarium venenatum NirenbergBF (Factor B) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium venenatum Nirenberg

短小芽孢桿菌PA2G4 (Proliferation Associated Protein 2G4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  pumilus

草木樨中華根瘤菌TSTA (Tumor Specific Transplantation Antigen) ELISA Kit用途: 固氮

光滑青霉3-NT (3-Nitrotyrosine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium glabrum

蜂房哈夫尼菌CSF3/GCSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

豌豆根瘤菌GDNF (Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit用途: 共生固氮

香菇EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

孟氏假單胞菌BMP-3 (Bone Morphogenetic Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii

麥根腐平臍蠕孢MASP (Mannan Binding Lectin Associated Serine Protease) ELISA Kit用途: 教學科研

灰葡萄孢菌*fMet (Formylmethionine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

球孢白僵菌MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana

克魯斯假絲酵母SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida  krusei

桑炭疽刺盤菌RNASE (Ribonuclease) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

乳酸乳球菌乳亞種ANG II R1/AGTR1 (Angiotensin II Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactococcus  lactis subsp.lactis

粉擬青霉UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
埃希氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規格IFRD1  干擾素相關發育調節蛋白1抗體(神經生長因子誘導蛋白PC4)正丁基苯酞;丁基酞內酯Butylphthalide中藥標準品  分 子 式: C12H14O2 分 子 量: 190.23836

PERP/p53 apoptosis effector related to PMP22  p53凋亡相關作用蛋白PMP22抗體新芒果苷Neomangiferin中藥標準品  分 子 式: C25H28O16 分 子 量: 584.48022

phospho-GATA-4(ser 262)  磷酸化GATA結合蛋白4抗體動物灌注液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

GPR109A/Puma gamma  G蛋白偶聯受體109A抗體安石榴甙Punicalagin中藥標準品  分 子 式: C48H28O30 分 子 量: 1084.72

SCN3B  電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體11-去氧澤瀉醇B11-Deoxyalisol B化學標準品 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 456.7

TIS11D/ERF2  表皮生長因子反應蛋白2抗體獐牙菜苷Sweroside中藥標準品  分 子 式: C16H22O9 分 子 量: 358.34

xCT/CCBR1  鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體氯化鈉溶液(1mol/L,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

 


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