|
- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3594
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3594 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
闊盤(pán)吸蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Eurytrema spp. | LZR3594 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
醋酸桿菌科CASP12 (Caspase 12) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacteraceae sp.
彎孢菌TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit 用途: 研究
粉紅單端孢NF-κB p65 (Nuclear Factor-κB p65) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
紋孢青霉OCLN (Occludin) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium striatisporum
繩狀青霉MIgA (Membrane IgA) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
病毒Cyt-C (Cytochrome C) ELISA Kit拉丁屬名: Infectious bursal disease virus
發(fā)酵乳桿菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus fermentum
紐纏叢梗孢BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit拉丁屬名: Monilia implicata
孟氏假單胞菌CD99 (Cluster of Differentiation 99) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
假單胞菌屬MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas sp
松生擬層孔菌ACTN3 (Actinin Alpha 3) ELISA Kit拉丁屬名: Fomitopsis pinicola
蘇云金芽孢桿菌IP-10/CXCL10 (Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit用途: 害蟲(chóng)生物防治
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌運(yùn)動(dòng)亞種CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Zymomonas mobilis subsp. mobilis
諾卡氏菌屬CAPF (Cuticular Active Peptide Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardioides alpinus
黃單胞菌NRG-2 (Neuregulin 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
闊盤(pán)吸蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格CDCREL/SEPT5 細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1洛柯堿6,10-Methanoindolo[3,2-b]quinolizine-11-methanol,9-ethylidene-5,6,8,9,10,11,11a,12-octahydro-2-methoxy-,(6S,7R,9E,10R,11R,11aS)-對(duì)照藥材 分 子 式: C20H24N2O2 分 子 量: 324.41676
SEPT6 細(xì)胞分化蛋白SEPT6抗體3,29-二苯甲酰基栝樓仁三醇3,29-Dibenzoyl rarounitriol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C44H58O5 分 子 量: 666.92832
Septin 8 細(xì)胞分化蛋白SEPT8抗體葒草素-2-0-B-L半乳糖苷"2"-O-beta-L-galactopyranosylorientin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H30O16 分 子 量: 610.15338
CCDC5 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體11-羥基-6-鐵屎米酮CANTHIN-6-ONE, 11-HYDROXY-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H8N2O2 分 子 量: 236.22552
BMP9 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體四氫小檗堿Canadine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H21NO4 分 子 量: 339.38
BMPER BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體DTT溶液(1mol/L,RNase free)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Angiotensin II type 1A receptor 緊張素Ⅱ1A型受體抗體Ficoll溶液(4% m/V)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
