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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3586
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-10
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3586 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腺熱埃里希體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Erlichia sennetsu | LZR3586 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
北京擲孢酵母AMY2 (Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces beijingensis
*蛹蟲草AIRA (Anti-Insulin Receptor Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
華特拉根瘤菌LTA4H (Leukotriene A4 Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium huautlense
宇佐美曲霉GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus usamii
枯草芽胞桿菌枯草亞種PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
灰色鏈霉菌灰色亞種CDSN (Corneodesmosin) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces griseus subsp. griseus
Bacillus aryabhattaiCCNB (Cyclin-B) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治、油料作物促進(jìn)產(chǎn)量
馬賽菌PKIβ (Protein Kinase Inhibitor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Massilia namucuonensis
芽胞桿菌MFG-E8 (Milk Fat Globule EGF Factor 8) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
阿氏葡萄球菌ELA2B (Elastase 2B) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus arlettae
釀酒酵母GAD-Ab (Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
少孢根霉SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus oligosporus
德式乳桿菌乳酸亞種CA242 (Pancreatic Carcinoma Markers-CA242) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii subsp lactic
多源中間根瘤菌HJV/HFE2 (Hemojuvelin/Hemochromatosis Type 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
腺熱埃里希體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格SLPI/ALK1 分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制因子抗體十一烯酸Undec-10-enoic acid其它化學(xué)試劑 分 子 式: C11H20O2 分 子 量: 184.2753
TPST1 酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶1抗體3β-乙?；R墩果酸中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
TPST2 酪蛋白硫酸轉(zhuǎn)移酶2抗體瑞香素二甲醚2H-1-Benzopyran-2-one,7,8-dimethoxy-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C11H10O4 分 子 量: 206.1947
AGPA/Alpha 1 Acid Glycoprotein α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體6,7-二羥基-4苯基香豆素6,7-dihydroxy-4-phenylcoumarin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H10O4 分 子 量: 254.2375
PIWIL4 piwi樣4蛋白抗體5，6-二氫甲氧醉椒素5,6-Dihydroyangonin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
CARD7/NALP1 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體α-蒎烯(1S)-(-)-Alpha-Pinene化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H16 分 子 量: 136.24
NALP4 癌/睪丸抗原58抗體4,5-二甲氧基鐵屎米酮6H-Indolo(3,2,1-de)(1,5)naphthyridin-6-one, 4,5-dimethoxy-對照藥材 分 子 式: C16H12N2O3 分 子 量: 280.27808
