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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

新疆鹽地桿菌KLK6 (Kallikrein 6) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium  xinjiangense

釀酒酵母TM (Thrombomodulin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

硫磺菌FAIM3 (Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

病毒CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Infectious       bronchitis virus

黃褐環(huán)銹傘GAL7 (Galectin 7)  ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

約氏黃桿菌NTXI (Cross Linked N-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium johnsoniae

榛色假單胞菌GPC3 (Glypican 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  avellanae

大腸埃希氏桿菌PPOX (Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli

埃里希青霉ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium ehrlichii

Chitinophaga sancti ABCG2 (ATP Binding Cassette Transporter G2) ELISA Kit 拉丁屬名: Chitinophaga sancti

雙孢蘑菇ADAMTS4 (ADAM with Thrombospondin Type 1 Motif4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

節(jié)桿菌屬LILRB4 (Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B Member 4) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter     pascens

秦氏蜜環(huán)菌PROS (Protein S) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

賈巴爾普爾毛殼TGF-β2 (Transforming Growth Factor β2) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium jabalpurense

哈茨木霉EK (Eepidermal Keratin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
人附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CaIPLA2/PLA2G6  胞漿鈣獨立磷脂酶A2抗體二苯并噻吩Dibenzothiophene 高端化學(xué)試劑 分 子 式: C12H8S 分 子 量: 184.25692

Netrin G1 ligand  軸突生長誘向因子G1配體抗體白皮杉醇trans-Piceatannol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C14H12O4 分 子 量: 244.24268

Netrin 4  軸突生長誘向因子4抗體豆甾-4, 22 -二烯– 3 - 酮Stigmasta-4,22-dien-3-one對照藥材 分 子 式: C29H46O 分 子 量: 410.67494

PAX4  配對盒同源基因4抗體Bouin's脫鈣液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Laminin 5  層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體輪環(huán)藤寧1,4,7,10-Tetraazacyclododecane中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C8H20N4 分 子 量: 172.2712

UGCGL2  二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

UGDH/UDPGDH  尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體龍膽苦苷(5R-trans)-6-(β-D-glucopyranosyloxy)-5,6-dihydro-5-vinyl-1H,3H-pyrano[3,4-c]pyran-1-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C16H20O9 分 子 量: 356.33