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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
貓附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3564
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3564
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

貓附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Eperythrozoon felix

LZR3564


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

微白倫茨氏菌Try2 (Trypsinogen II) ELISA Kit拉丁屬名: Lentzea albida

溶淀粉類芽孢桿菌C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus amylolyticus

沉積物鹽坑微菌SNRPD1 (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1) ELISA Kit 拉丁屬名: Salinimicrobium sediminis

Brenneria salicis OSF (Osteoclast Stimulating Factor 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

生活飲用水  總硬度、氯化物 GZMK (Granzyme K) ELISA Kit拉丁屬名: 生活飲用水  總硬度、氯化物

凍膠假絲酵母MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  gelida

產(chǎn)朊假絲酵母CRN (Corin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  utilis

尖鐮孢 葫蘆專化型D5R/DRD5 (Dopamine Receptor D5) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

南方鹽單胞菌PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas meridiana

灰樹花-1C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

膠孢TF (Transfer Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

球孢白僵菌SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit 用途: 蛾類防治

解淀粉芽胞桿菌植物亞種GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum

淺囊狀栓菌ANGPT4 (Angiopoietin 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

平菇EXT1 (Exostoses 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
貓附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商DICER1/Dicer  核糖核酸酶Dicer抗體苦瓜皂苷 L(3beta,7beta,9beta,10alpha,17beta)-7-(beta-D-glucopyranosyloxy)-3-hydroxy-17-[(3E)-5-hydroxy-1,5-dimethylhex-3-en-1-yl]-4,4,14-trimethylestr-5-ene-9-carboxaldehyde化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H58O9 分 子 量: 634.84032

Cullin 4B  CUL4B蛋白抗體3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-醇3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C32H52O3 分 子 量: 484

TIAM1  T侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體PBST(1 pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

SRD5A2  類固醇5α還原酶2抗體膽維他Anethole Trithione中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C10H8Os3 分 子 量: 240.35

ANAPC1  細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

AGEs  晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體甲基原纖細(xì)薯蕷皂苷b-D-Glucopyranoside, (3b,22a,25R)-26-(b-D-glucopyranosyloxy)-22-methoxyfurost-5-en-3-yl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®3)]-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C52H86O23 分 子 量: 1079.22544

Calpastatin  鈣蛋白酶抑制蛋白抗體氯化天竺葵素-3-O-蕓香糖苷Pelargonidin-3-O-rutinoside chloride化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27O14+.Cl- 分 子 量: 583.7335

 


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