- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3564
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3564 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
貓附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Eperythrozoon felix | LZR3564 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
微白倫茨氏菌Try2 (Trypsinogen II) ELISA Kit拉丁屬名: Lentzea albida
溶淀粉類芽孢桿菌C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus amylolyticus
沉積物鹽坑微菌SNRPD1 (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1) ELISA Kit 拉丁屬名: Salinimicrobium sediminis
Brenneria salicis OSF (Osteoclast Stimulating Factor 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
生活飲用水 總硬度、氯化物 GZMK (Granzyme K) ELISA Kit拉丁屬名: 生活飲用水 總硬度、氯化物
凍膠假絲酵母MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Candida gelida
產(chǎn)朊假絲酵母CRN (Corin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida utilis
尖鐮孢 葫蘆專化型D5R/DRD5 (Dopamine Receptor D5) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
南方鹽單胞菌PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas meridiana
灰樹花-1C4b (Complement Component 4b) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
膠孢TF (Transfer Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
球孢白僵菌SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit 用途: 蛾類防治
解淀粉芽胞桿菌植物亞種GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum
淺囊狀栓菌ANGPT4 (Angiopoietin 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
平菇EXT1 (Exostoses 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
貓附紅細(xì)胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商DICER1/Dicer 核糖核酸酶Dicer抗體苦瓜皂苷 L(3beta,7beta,9beta,10alpha,17beta)-7-(beta-D-glucopyranosyloxy)-3-hydroxy-17-[(3E)-5-hydroxy-1,5-dimethylhex-3-en-1-yl]-4,4,14-trimethylestr-5-ene-9-carboxaldehyde化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H58O9 分 子 量: 634.84032
Cullin 4B CUL4B蛋白抗體3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-醇3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H52O3 分 子 量: 484
TIAM1 T侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體PBST(1 pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
SRD5A2 類固醇5α還原酶2抗體膽維他Anethole Trithione中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H8Os3 分 子 量: 240.35
ANAPC1 細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0,非無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
AGEs 晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體甲基原纖細(xì)薯蕷皂苷b-D-Glucopyranoside, (3b,22a,25R)-26-(b-D-glucopyranosyloxy)-22-methoxyfurost-5-en-3-yl O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®3)]-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C52H86O23 分 子 量: 1079.22544
Calpastatin 鈣蛋白酶抑制蛋白抗體氯化天竺葵素-3-O-蕓香糖苷Pelargonidin-3-O-rutinoside chloride化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27O14+.Cl- 分 子 量: 583.7335