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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3539
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-13
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3539 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
腦胞內(nèi)原蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Encephalitozoon spp. | LZR3539 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
多主棒孢菌sgp130 (soluble Glucoprotein 130) ELISA Kit拉丁屬名: Corynespora cassiicola
毛霉屬OSM (Oncostatin M) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor sp.
乙酸鈣不動(dòng)桿菌LUM (Lumican) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter calcoaceticus
點(diǎn)柄粘蓋牛肝MCRS1 (Microspherule Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Suillus granulatus
弗雷德里克斯堡假單胞菌UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
釀酒酵母SEMA3B (Semaphorin 3B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Paraburkholderia sp.FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Paraburkholderia sp.
短小芽孢桿菌snRNP/Sm (Small Nuclear Ribonucleoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
紫麥角菌CNX (Calnexin) ELISA Kit拉丁屬名: Claviceps purpurea
艾登短芽孢桿菌ARRβ1 (Arrestin Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevibacillus aydinogluensis
節(jié)桿菌GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter alpinus
雷州灣芽孢桿菌AVPR1A (Arginine Vasopressin Receptor 1A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus neizhouensis
亮白曲霉Bid (BH3 Interacting Domain Death Agonist) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus candidus
鞘氨單胞菌屬C3c (Complement Fragment 3c) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas hylomecon sp. Nov
變異居白蟻菌TI-Ag (Thymus Independent Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Isoptericola variabilis
腦胞內(nèi)原蟲屬通用·探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CA8 碳酸酐酶相關(guān)蛋白8抗體FAB固定液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CACNB1 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體1,4,5,6-四羥基-7-苯基氧蒽酮1,4,5,6-Tetrahydroxy-7-(3-methylbut-2-en-1-yl)-9H-xanthen-9-one對(duì)照藥材 分 子 式: C18H16O6 分 子 量: 328.31604
CDK5RAP3 周期素依賴性激酶5激活結(jié)合蛋白C53抗體草酸Oxalic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C2H2O4 分 子 量: 90.03
CENPH 著絲粒蛋白H抗體12-乙酰氧基松香酸12-Acetoxyabietic acid對(duì)照藥材 分 子 式: 分 子 量:
CKAP4 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體4-表可木酸1-Naphthalenecarboxylic acid,
decahydro-1,4a-dimethyl-6-methylene-5-[(2E)-3-methyl-2,4-pentadienyl
]-, (1R,4aR,5S,8aR)-對(duì)照藥材 分 子 式: C20H30O2 分 子 量:
CRISP3 富含半胱氨酸分泌蛋白3抗體等效-16beta,17-二羥基-19-異貝殼杉烷酸Kauran-18-oic acid,16,17-dihydroxy-, (4a)-對(duì)照藥材 分 子 式: C20H32O4 分 子 量: 336.46568
CKMT/Creatine kinase MT 酸性型線粒體肌酸激酶抗體油酸甲酯Methyl oleate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H36O2 分 子 量: 296.49
