- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3537
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-01-13
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3537 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
施氏油脂線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Elaeophora schneideri | LZR3537 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
紅酵母屬P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula sp.
熱帶假絲酵母MCT (Mast Cell Tryptase) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis
壁芽孢桿菌CLS (Cardiolipin Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus muralis
犬種布魯氏菌GzmA (Granzyme A) ELISA Kit拉丁屬名: canis
油菜菌核病菌MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
豌豆根瘤菌PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium leguminosarum
花楸近藤氏酵母SSFA2 (Sperm Specific Antigen 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Kondoa sorbi
大腸埃希氏桿菌LFA-2/CD2 (Lymphocyte Function Associated Antigen 2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
三線鐮刀菌MAG Ab (Anti-Myelin Associated Glycoprotein Antibody) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
北京擲孢酵母 MSLN (Mesothelin) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces beijingensis
ATCC 700425CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus gallinarum
哈茨木霉ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
發(fā)光假蜜環(huán)菌REG1β (Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Armillaria tabescens
豇豆慢生根瘤菌TAP (Trypsinogen Activation Peptide) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮
施氏油脂線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 Rab25 癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體黨參炔醇4,12-Tetradecadiene-8,10-diyne-1,6,7-triol化學標準品 分 子 式: C14H18O3 分 子 量: 234.29092
Testis 抑制基因Testin抗體苔黑酚龍膽二糖苷b-D-Glucopyranoside,3-hydroxy-5-methylphenyl 6-O-b-D-glucopyranosyl-中藥標準品 分 子 式: C19H28O12 分 子 量:
ZNF288/ZBTB20 鋅指蛋白288抗體吲哚-3-丙烯酸甲酯(E)-Methyl 3-(1H-indol-3-yl)acrylate化學標準品 分 子 式: C12H11NO2 分 子 量: 201.22124
ALOX15/15 Lipoxygenase 1 花生四烯酸15脂氧合酶1抗體左旋馬尾松樹脂醇Vladinol A對照藥材 分 子 式: C20H24O8 分 子 量: 392.39976
ABI3BP ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體鉤吻素己Humantenmine中藥標準品 分 子 式: C19H22N2O3 分 子 量: 326.38958
MTCBP1/ADI1 膜型基質(zhì)金屬蛋白酶胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1抗體HEPES粉劑(1mol/L,Free Acid)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
BCMP11/AGR3 膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2)澤瀉醇AAlisol A中藥標準品 分 子 式: C30H50O5 分 子 量: 490.715