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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3531
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-13
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3531 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
弗格森艾利希體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Ehrlichia fergusonii | LZR3531 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
玉蜀黍平臍蠕孢*DCN (Decorin) ELISA Kit用途: 病原菌
缺陷短波單胞菌CLDN11 (Claudin 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Brevundimonas diminuta
微黃色芽孢桿菌DKK4 (Dickkopf Related Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus luteolus
尖孢鐮孢S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8/Calgranulin A) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum
雞傷寒沙門氏菌Slit2 (Slit Homolog 2) ELISA Kit拉丁屬名: gallinarum
腐皮鐮刀菌(都只確定鐮刀屬)PTHrP (Parathyroid Hormone Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Haematonectria haematococca
葉居菌Pg (Progesterone) ELISA Kit拉丁屬名: Frondihabitans peucedani
釀酒酵母Collagenase I ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母ITIH4 (Inter Alpha-Globulin Inhibitor H4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
冷纖維單胞菌GDF3 (Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Cellulomonas gelida
根瘤菌GS (Gelsolin) ELISA Kit用途: 固氮
盤長孢狀刺盤孢OBTF4 (Octamer Binding Transcription Factor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Glomerella cingulata
三葉草根瘤菌CNTNAP2 (Contactin Associated Protein Like Protein 2) ELISA Kit 用途: 與白三葉草共生固氮
釀酒酵母INSL3 (Insulin Like Protein 3) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
樺剝管菌CCRL1 (Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
弗格森艾利希體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CYP11B2 醛固酮合成酶CYP11B2抗體番石榴二醛Guajadial對照藥材 分 子 式: 分 子 量:
ANKRD53 錨蛋白重復(fù)域53抗體天竺葵素（氯化花葵素）1-Benzopyrylium,3,5,7-trihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-, chloride (1:1)中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H11O5+.Cl- 分 子 量: 306.69784
LCA/Lens culinaris agglutinin 扁豆凝集素靈芝醛ALanosta-7,9(11),24-trien-26-al,3-oxo-, (24E)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H44O2 分 子 量:
ZnT-1 鋅轉(zhuǎn)運蛋白1抗體二氫辣椒堿N-(4-Hydroxy-3-methoxybenzyl)-8-methylnonanamide中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H29NO3 分 子 量: 307.42776
NPD014 1號染色體開放閱讀框63抗體查斯曼寧堿化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
RBP/Retinol binding protein 視黃醇結(jié)合蛋白抗體表蘇木醇2H-1-Benzopyran-3,4,7-triol,3-[(3,4-dihydroxyphenyl)methyl]-3,4-dihydro-, (3R,4R)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H16O6 分 子 量:
PMCA1 細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體苦參醇M4H-1-Benzopyran-4-one,2-(2,4-dihydroxyphenyl)-2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-6-(3-methyl-2-buten-1-yl)-8-[(2R)-5-methyl-2-(1-methylethenyl)-4-hexen-1-yl]-,(2R,3R)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H36O7 分 子 量: 508.60264
