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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3516
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-01-13
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3516 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
長鼻分咽線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Dispharynx nasuta | LZR3516 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
噬尼古丁節(jié)桿菌MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit 用途: 微生物肥料
微紫青霉CPR (Cytochrome P450 Reductase) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium janthinellum
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種GDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
玉蕈、真姬菇ACP3/PAP (Prostatic Acid Phosphatase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Hypsizgus marmoreus (Perk) Bigelus
里氏木霉CCKBR (Cholecystokinin B Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黃傘(10號)TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
短波單胞菌屬PDE4D (Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas basaltis
枯草芽孢桿菌NUP107 (Nucleoporin 107kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母SPC (Pulmonary Surfactant Associated Protein C) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
紫帶擬迷孔菌PRB2 (Basic Salivary Proline Rich Protein 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黑曲霉BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
球孢白僵菌GLRX3 (Glutaredoxin 3) ELISA Kit用途: 生物防治
青枯假單胞菌FPR2 (Formyl Peptide Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas solanacearum (Smith) Smith
解脂亞羅酵母LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
釀酒酵母CNTF (Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
長鼻分咽線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商AFP(A4) 甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)異紅花八角醇Isodunnianol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H26O3 分 子 量: 398.49354
BSCL2/SPG17 先天性蛋白2抗體（常染色體顯性遺傳痙攣性17）五脂酮ASchisanlignone A化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
IL-6 白介素6抗體次大風(fēng)子素Hydnocarpin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H20O9 分 子 量: 464.4209
4 Hydroxynonenal 4羥基壬烯酸抗體高根二醇Erythrodiol對照藥材 分 子 式: C30H50O2 分 子 量: 442.7168
NANOS2 生殖細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷BRASSIDIN化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
CTBP2 C末端結(jié)合蛋白2抗體厚樸酚5,5'-Diallyl-[1,1'-biphenyl]-2,2'-diol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H18O2 分 子 量: 266.33432
PTGER1 素EP1受體抗體過碘酸溶液(0.5%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
