- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3505
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-01-13
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3505 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
革蜱探針法熒光定量PCR試劑盒 | Dermacenter spp. | LZR3505 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
短小芽孢桿菌ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
特尼里弗諾卡氏菌8-epi-PGF2α (8-Epi-Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardia tenerifensis
太平洋白單胞菌SNCa (Synuclein Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Albimonas pacifica
大腸埃希氏菌ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
交鏈孢屬AMACR(Alpha-methylacyl-CoA racemase) ELISA kit拉丁屬名: Alternaria sp.
瓦克青霉CCNA1(Cyclin-A1) ELISA kit拉丁屬名: Penicillium waksmanii
釀酒酵母RELN (Reelin) ELISA kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
巴斯德畢赤酵母IL-27 (Interleukin 27) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia pastoris
蔗糖小迫氏菌GPIb (Platelet Membrane Glycoprotein Ib) ELISA Kit拉丁屬名: Kosakonia sacchari
球孢白僵菌GP6 (Glycoprotein VI, Platelet) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
球毛殼菌STAT3 (Signal Transducer and Activator of Transcription 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鹿皮色曲霉JAK2 (Janus Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus cervinus
根瘤菌SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 用途: 與蒙古巖黃芪共生固氮
灰酒紅鏈霉菌FPN (Ferroportin) ELISA Kit用途: 分類 研究
桃色枝頂孢ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit拉丁屬名: Acremonium persicinum
革蜱探針法熒光定量PCR試劑盒 ID3 DNA結合抑制因子3抗體硫酸鐵銨溶液(2%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
LC3C 微管相關蛋白輕鏈3C抗體三七皂苷FCNotoginsenoside Fc中藥標準品 分 子 式: C58H98O26 分 子 量: 1211.38312
MAGEF1 抗原F蛋白家族1抗體單咖啡酰酒石酸(2R,3R)-2-(((E)-3-(3,4-Dihydroxyphenyl)acryloyl)oxy)-3-hydroxysuccinic acid,Caftaric acid中藥標準品 分 子 式: C13H12O9 分 子 量: 312.22898
Msx2/Hox8 同源盒基因Msx2抗體安息香2-Hydroxy-1,2-diphenylethanone化學標準品 分 子 式: C14H12O2 分 子 量: 212.24388
NMT2 肉豆蔻酰基轉移酶2-N端肽抗體知母皂苷BIIIb-D-Galactopyranoside, (3b,5b,25S)-26-(b-D-glucopyranosyloxy)furost-20(22)-en-3-yl 2-O-b-D-glucopyranosyl-中藥標準品 分 子 式: C21H40O5 分 子 量: 372.5393
DOK3 對接蛋白3抗體維生素B1THIAMINE HYDROCHLORIDE維生素類 分 子 式: C12H17ClN4Os.HCl 分 子 量: 337.27
NRG3 神經(jīng)調節(jié)蛋白3抗體長壽花糖甙2-Cyclohexen-1-one,4-[(1E,3R)-3-(a-Dglucopyranosyloxy)- 1-butenyl]-4-hydroxy-3,5,- 5-trimethyl-,(4S)- 對照藥材 分 子 式: 分 子 量: