- 品牌:聯祖
- 產地:進口、國產
- 貨號:LZR3476
- 價格: ¥3800/盒
- 發布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-01-13
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3476 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
偽結核棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Corynebacterium pseudotuberculosis | LZR3476 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
假單胞菌MHB (Methemoglobin) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有處理養殖廢水潛力。
小孢矛束霉Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Cephalotrichum microsporum
米曲霉MALB (Microalbumin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
霍氏腸桿菌MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Enterobacter hormaechei
堀越氏芽孢桿菌MCP-2 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus horikoshii
白色念珠菌MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida albicans
MarisediminicolaMCP-4 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Marisediminicola antarctica
山茶Smad1 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 1) ELISA Kit拉丁屬名: Colletotrichum coccodes
黑曲霉Smad4 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
岸海桿狀菌MTL (Motilin) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter litoralis
葡萄座腔菌屬AMH (Anti-Mullerian Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
糙孢籃狀菌M-ACHR (Muscarinic AcetylcholineReceptor) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces trachyspermus
綠色木霉=木素木霉MBP (Myelin Basic Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma viride Persoon :Fries=Trichoderma lignorum (Tode) Harz
堅強芽孢桿菌AGER (Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus firmus
扣囊復膜孢酵母OXB (Orexin B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
偽結核棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應商CDC4/FBW7/SEL10 抑制因子FBW7抗體過氧化物酶封閉液(H2O2法)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CADM 4 細胞粘附分子4抗體黃花菜木脂素 A9H-Pyrano[2,3-f]-1,4-benzodioxin-9-one,2,3-dihydro-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-(hydroxymethyl)-5-methoxy-,(2R,3R)-rel-對照藥材 分 子 式: C20H18O8 分 子 量: 386.35212
DAB2IP Dab2相互作用蛋白抗體木犀草素2-(3,4-Dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4H-chromen-4-one中藥標準品 分 子 式: C15H10O6 分 子 量: 286.2363
DAB2 信號轉導功能磷蛋白DAB2抗體Tris-EDTA緩沖液(1×TE,pH7.4)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ADRB3/beta 3 Adrenergic Receptor β3腎上腺素能受體抗體粗莖烏頭堿甲Crassicauline A化學標準品 分 子 式: C35H49NO10 分 子 量: 643.76426
DACH1 細胞命運決定因子DACH1抗體二乙酸松屬素酯(S)-4-Oxo-2-phenylchroman-5,7-diyl diacetate對照藥材 分 子 式: C19H16O6 分 子 量: 340.32674
DRG1 GTP發育調控結合蛋白1抗體肉桂醛Cinnamaldehyde中藥標準品 分 子 式: C9H8O 分 子 量: 132.15922