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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

米曲霉VCAM-1 (Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

Bacillus tequilensisVIP (Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

科氏葡萄球菌科氏亞種FOS (V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit   拉丁屬名: Staphylococcus  cohnii subsp. cohnii

水生哈薩克斯坦酵母VASPIN (Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit 拉丁屬名: Kazachstania aquatica

美味牛肝菌VF (Visfatin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希氏菌vWF (von Willebrand Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

爪哇根霉α Manase (α mannosidase) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus  javanicus

鏈格孢α1-AGP (α1-Acid glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria alternata

枯草芽胞桿菌α1-MG (α1-Microglobulin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

刺囊毛霉α2-AP (α2-Antiplasmin) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor spinosus

枯草芽孢桿菌α2-PI (α2-plasmin inhititor) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

金白F4(金針菇)Gal (α-galactoyl) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

美澳型核果褐腐病菌α-Glu (Alpha Glucosidase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

季也蒙邁耶氏酵母α-GST (α-glutathione S-transferases) ELISA Kit拉丁屬名: Meyerozyma guilliermondii

嗜熱脂肪芽胞桿菌IDUA (Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒 FUCA1/Alpha L fucosidase I  α-L巖藻糖苷酶抗體異水飛薊賓Isosilybin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C25H22O10 分 子 量: 482.44

TNFR1/TNF Receptor I  受體1抗體4-磺酰胺基苯肼鹽酸鹽4-Sulfonamide-phenylhydrazine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C6H9N3O2S 分 子 量: 187.21956

HHV8/ORF K14  人類病毒8 ORF14抗體紫花前胡苷Nodakenin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C20H24O9 分 子 量: 408.40

SEMA6D  軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷matairesinol 4'-O- gentiobioside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H42O16 分 子 量: 682.666

plant lectin B4/IB4  植物凝集素IB4丁香酸Syringic acid脂肪酸類 分 子 式: C9H10O5 分 子 量: 198.17

SNX1/Sorting nexin1  分選連接蛋白1抗體五味子丙素WUWEIZISU C中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C22H24O6 分 子 量: 384.42

ERG25  甲基固醇羥化酶單加氧酶1抗體金盞花苷E;去葡萄糖竹節(jié)參皂苷化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量: