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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3418
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-01-13
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3418 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Cephalosporium spp. | LZR3418 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
金黃殼囊孢S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
海角副球菌S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit 拉丁屬名: Paracoccus homiensis
擬莖點(diǎn)霉S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平田頭菇S100A6 (S100 Calcium Binding Protein A6) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
廣島鏈霉菌S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces hiroshimensis
硬桿菌SDH (Sorbitol Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
果生鏈核盤菌sPLA2 (Screted Phospholipase A2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
異常漢遜酵母變種SCT (Secretin) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala (Hansen) H. et P.
芬娜冬菇sIgA (Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit拉丁屬名: Flammulina fennae
枯草芽胞桿菌枯草亞種SEPP1 (Selenoprotein P) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
特異青霉（產(chǎn)黃青霉）SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium notatum Westling
血痕韌革菌STK (serine/threonine protein kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鹽古桿菌SAA (Serum amyloid A) ELISA Kit拉丁屬名: Natrinema sp.
高盧蜜環(huán)菌SESN1 (Sestrin 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢白僵菌SESN2 (Sestrin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Beauveria bassiana
頭孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格eIF4EBP1/4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體大麻烯Canniprene對照藥材 分 子 式: C21H26O4 分 子 量: 342.42874
phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體商陸皂苷辛esculentoside H中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
phospho-eIF4EBP1(Thr37/46) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體乙酸鈉溶液(3mol/L,pH4.8,RNase free)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體對羥基苯甲醛4-Hydroxybenzaldehyde中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H6O2 分 子 量: 122.12134
phospho-EIF4EBP1(Ser100) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體美格魯特N-BUTYLDEOXYNOJIRIMYCIN中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H21NO4 分 子 量: 219.27804
phospho-EIF4EBP1(Ser111) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體巖大戟內(nèi)酯Ejolkinolide E化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H28O2 分 子 量: 300.435
EIF5 真核翻譯起始因子5抗體美商陸酸Olean-12-ene-28,29-dioicacid, 3,23-dihydroxy-, 29-methyl ester, (3b,4a,20b)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C31H48O6 分 子 量: 516.70922
