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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
節瘤擬桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3509
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-01-13
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3509
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

節瘤擬桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

Dichelobacter nodosus

LZR3509


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品:

孔曲霉DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  ostianus

枯草芽孢桿菌枯草亞種EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

炭黑曲霉PACAP (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  carbonarius

蠟狀芽孢桿菌5-HETE (5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

弗氏檸檬酸菌CALP (Calprotectin) ELISA kit拉丁屬名: Citrobacter  freundii

解脂復膜孢酵母(亞羅解脂酵母)ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis lipolytica(YarrowYarrowia lipolytica)

鮑魚菇GPIb-IX-V (Platelet Membrane Glycoprotein GPIb-IX-V Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus  abalonus

粉紅單端孢霉SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

豬絲菌IL-25 (Interleukin 25) ELISA Kit拉丁屬名: rhuriopathiae

玉米大斑病菌POSTN/OSF-2 (Periostin) ELISA Kit  拉丁屬名: Setosphaeria tuicicum

厚垣孢普可尼亞菌BAFF/CD257 (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit用途: 用作生物防治研究

米蘭農霉菌NFκB2 (Nuclear Factor Kappa B2) ELISA Kit拉丁屬名: Agromyces mediolanus

墨西哥假黃色單胞菌RELB (V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudoxanthomonas mexicana

枯草芽孢桿菌PDPN (Podoplanin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis

細黃鏈霉菌PCT (Procalcitonin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
節瘤擬桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 KIST/UHMK1  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶KIST抗體(激酶相互作用與相關基因)D-Hanks平衡鹽粉劑(1×,含酚紅)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NEK3  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek3抗體蛇紋石素Serpentine對照藥材 分 子 式: C21H22N2O3 分 子 量:

TRIB2  MAPK調控蛋白TRB2抗體香豆素2H-Chromen-2-one中藥標準品  分 子 式: C9H6O2 分 子 量: 146.14274

TTBK1/BDTK  腦源性tau蛋白激酶抗體葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

EMP2  上皮細胞膜蛋白2抗體蔗糖溶液(50%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

HEF1  蛋白激酶底物相關蛋白抗體14-hydroxy sprengerinin C(3beta,25R)-14-Hydroxyspirost-5-en-3-yl O-6-deoxy-alpha-L-mannopyranosyl-(1-2)-O-[beta-D-xylopyranosyl-(1-4)]-beta-D-glucopyranoside中藥標準品  分 子 式: C44H70O17 分 子 量: 871.0164

Brk/PTK6  酪氨酸蛋白激酶6(激酶)二氫尼洛替星Lanost-7-ene-3,23-diol,24,25-epoxy-, (3b,13a,14b,17a,20S,23R,24S)-對照藥材 分 子 式: C30H50O3 分 子 量:

 


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