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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3480
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-12
- 更新日期： 2025-01-13
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3480 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
反芻獸考德里氏體探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Cowdria ruminantium | LZR3480 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
構(gòu)巢曲霉OFQ/N (Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus nidulans
李季倫氏環(huán)桿菌GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Cyclobacterium lianum
紫色游動(dòng)放線菌GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes violaceus
藍(lán)綠小四孢菌OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。
根瘤菌ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
百脈根中間根瘤菌OSF (Osteoclast Stimulating Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Mesorhizobium loti
黑曲霉ON (Osteonectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
納西桿菌屬OPN (Osteopontin) ELISA Kit 拉丁屬名: Naxibacter
乳酸乳球菌乳亞種OPGL (Osteoprotegerin Ligand) ELISA Kit拉丁屬名: Lactococcus lactis subsp.lactis
棘孢曲霉ACH (Acetylcholine) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus aculeatus
絳紅鏈霉菌OVA SIgM (Ovalbumin Specific IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces purpureus
表皮葡萄球菌OVA sIgE (Ovalbumin specific Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus epidermidis
色鹽桿菌CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit拉丁屬名: Chromohalobacter pacificum
球形賴氨酸芽孢桿菌Tryptophan Hydroxylase 1(TPH1) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
粗糙脈孢菌OLAb (Oxidized Lowdensity Lipoprotein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Neurospora crassa
反芻獸考德里氏體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商CD200/MOX1 膜糖蛋白CD200抗體巨豆三烯酮4-(But-2-en-1-ylidene)-3,5,5-trimethylcyclohex-2-enone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C13H18O 分 子 量: 190.28142
CD66c/CEACAM6 癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體異石當(dāng)歸素Isosaxalin對(duì)照藥材 分 子 式: 分 子 量:
CPA1/Carboxypeptidase A 胰羧肽酶A1抗體五水合硫酸司巴丁(-)-Sparteine sulfate pentahydrate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H26N2.H2O4S 分 子 量: 332.45882
CPA2/Carboxypeptidase A2 羧肽酶A2抗體STM溶液(2M,pH7.4)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CPB1/Carboxypeptidase B1 胰羧肽酶B1抗體4'-O-甲基葛根素4'-O-Methylpuerarin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H22O9 分 子 量: 430.40468
CPEB1 細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體(-)-荷包牡丹堿甲氯化物1,3-Dioxolo[4,5-g]isoquinolinium,5-[(6S)-6,8-dihydro-8-oxofuro[3,4-e]-1,3-benzodioxol-6-yl]-5,6,7,8-tetrahydro-6,6-dimethyl-,chloride (1:1), (5R)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H20NO6+.Cl- 分 子 量: 417.8396
Cystatin E/M 半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體11-羰基-Β-乙酰乳香酸Acetyl-11-keto-beta-boswellic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H48O5 分 子 量: 512.72052
