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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
鴿病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3465
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-01-13
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3465
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

鴿病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒

Columbid Herpes Virus 1(CHV-1)

LZR3465

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

云芝栓孔菌 (變色栓菌)GCP-2 (Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Trametes versicolor

假單胞菌G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

羅伊氏乳桿菌Gzms-A (Granzymes A) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  reuteri

大斑凸臍蠕孢Gzms-B( Granzymes B) ELISA Kit拉丁屬名: Exserohilum turcicum

喜乳糖擬泡囊擔孢酵母GREM1 (GremLin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cystobasidiopsis lactophilus

谷氨酸棒桿菌Ⅲ型GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

大腸埃希菌GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: coli

黑附球菌GDF3 (Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Epicoccum nigrum Link

無花果曲霉GDF5 (Growth Differentiation Factor 5) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  ficuum

銹赤蠟黃鏈霉菌GDF9 (Growth Differentiation Factor 9) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces rubiginosohelvolus

膜醭假絲酵母GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit拉丁屬名: Candida membranifaciens

堿線菌屬GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Natrinema  sp

Rhizobium multihospitium GRB10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

甘蔗生節棱孢GRB14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrinium saccharicola

根瘤菌GRB2 (Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鴿病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase  病毒NS4B(65kDa)抗體羧芐青霉素溶液(Carbenicillin,50mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

SORBS2/ArgBP2  精氨酸結合蛋白2抗體β-蒎烯(1S,5S)-6,6-Dimethyl-2-methylenebicyclo[3.1.1]heptane化學標準品 分 子 式: C10H16 分 子 量: 136.23404

BNP  腦鈉素/利鈉肽抗體洋紫蘇醇B1H-Naphtho[2,1-b]pyran-1-one,6-(acetyloxy)-3-ethenyldodecahydro-5,10,10b-trihydroxy-3,4a,7,7,10a-pentamethyl-,(3R,4aR,5S,6S,6aS,10S,10aR,10bS)-對照藥材 分 子 式: C22H34O7 分 子 量: 410.50116

p70 S6 kinase beta  核糖體蛋白S6激酶1抗體酒石酸長春質堿化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

CD20  CD20抗體原蘇木素B(7S)-3,7,10,11-Tetrahydroxy-7,8-dihydro-6H-dibenzo[b,d]oxocin-7-methanol中藥標準品  分 子 式: C16H16O6 分 子 量: 304.29464

Complement C3 beta chain  補體C3b抗體土克甾酮Cholest-7-en-6-one,2,3,11,14,20,22,25- heptahydroxy-,(2a,3a,5a,11R,22R)- 中藥標準品  分 子 式: C27H44O8 分 子 量: 496.63346

C3a/C3a anaphylatoxin  補體C3a過敏毒素抗體氯化錦葵色素-3-O-半乳糖苷1-Benzopyrylium, 3-(b-D-galactopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-,chloride (1:1)化學標準品 分 子 式: C23H25O12+.Cl- 分 子 量: 528.8904


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