產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3441 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Cladosporium spp. | LZR3441 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
黃桿菌MYO (Myoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium sp.
小孢根霉原變種Tn-T (Troponin T) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus var. microsporus
中慢生根瘤菌Tn-I (Troponin I) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
溜曲霉PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tamarii
多孢木霉ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
蘇云金芽胞桿菌NSE (Neuron Specific Enolase) ELISA Kit用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關基礎研究。
臭曲霉GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit用途: 糖化酶產生菌
小橢圓接合酵母SP-A (Pulmonary Surfatcant-Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Zygosaccharomyces microellipsoides
歧皺青霉Smad7 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium steckii
葉球鞘氨單胞菌NE (Neutrophil Elastase) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas phyllosphaerae
谷氨酸棒桿菌IL-12/p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
干酪乳桿菌IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus casei
假單胞菌屬MBP/MBL (Mannma Binding Protein/Mannan Binding Lectin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp
微球菌AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.
蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枝孢霉通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Phospho-MKP1 (Ser318) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體X-gal(20mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質激素ACTH(18-39)抗體褐煤酸Octacosanoic acid化學標準品 分 子 式: C28H56O2 分 子 量: 424.74304
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質激素ACTH (7-23)抗體3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀烷;美迪紫檀素methyl-中藥標準品 分 子 式: C37H61NO13 分 子 量: 727.87914
Actin α/alpha-SMA 肌動蛋白α(α-SMA)抗體高香草酸硫酸鹽Benzeneacetic acid,3-methoxy-4-(sulfooxy)-化學標準品 分 子 式: C9H10O7S 分 子 量: 262.2365
Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2 α橫紋肌輔肌動蛋白/α-SCA抗體L-賴氨酸L-Lysine化學標準品 分 子 式: C6H14N2O2 分 子 量: 146.18756
alpha Actinin 4 α-輔肌動蛋白4抗體二乙酸丁香樹脂醇酯Syringaresinol diacetate對照藥材 分 子 式: C26H30O10 分 子 量: 502.5104
F-Actin 纖維狀肌動蛋白抗體關附甲素Hetisan-2,11,13,14-tetrol,2,13-diacetate, (2a,11a,13R)-中藥標準品 分 子 式: C24H31NO6 分 子 量: 429.50604