- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3425
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-12
- 更新日期: 2025-01-13
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3425 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
貓衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒 | Chlamydia felis | LZR3425 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
虎皮粘蓋牛肝菌IL-27 (Interleukin 27) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌TEF (Thyrotroph Embryonic Factor) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
松針散斑殼TRH (Thyrotropin-releasing Hormone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌TAb (Thyroxine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
大腸埃希氏菌TBG (Thyroxine Binding Globulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
嚙蝕艾肯氏菌T4 (Thyroxine) ELISA Kit拉丁屬名: Eikenella corrodens
星孢鏈霉菌TJP1 (Tight Junction Protein 1) ELISA Kit 用途: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性
大腸埃希氏桿菌TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
凝結(jié)芽孢桿菌TF (Tissue factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus coagulans
蘇云金芽孢桿菌TIMP-2 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 2) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治
枯草芽孢桿菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
產(chǎn)氨棒桿菌TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium ammoniagenes
釀酒酵母TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
紅球菌t-PA (Tissue-type Plasiminogen Actilyse) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus qingshengii
挪威假絲酵母TLR9 (Toll-like Receptor 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida norvegensis
貓衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒 ABCA1/ABC1 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗體異新補(bǔ)骨脂異黃酮2',3'-Dihydro-2',2'-dimethyl-7-hydroxy-3,6'-bi-(4H-1-benzopyran)-on-4化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H16O5 分 子 量: 336.33804
ABCD1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體去甲基川陳皮素2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-6,7,8-trimethoxy-4H-chromen-4-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20O8 分 子 量: 388.368
ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體托吡酯topiramate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H21NO8S 分 子 量: 339.36
ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體5-戊基間苯二酚5-Pentylbenzene-1,3-diol對照藥材 分 子 式: C11H16O2 分 子 量: 180.24354
ABCF1 ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體麥冬皂苷COphiopogonin C中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C46H72O17 分 子 量: 897.058
ABCG1 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體7-O-甲基杧果苷 7-O-Methylmangiferin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20O11 分 子 量: 436.366
ABCG2/CD338 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體柯諾辛Corynoxan-16-carboxylicacid, 16,17-didehydro-17-methoxy-2-oxo-, methyl ester, (16E)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H28N2O4 分 子 量: 384.46872