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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
犬腺體病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規格
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3398
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-01-13
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3398
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

犬腺體病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規格

Canine Adenovirus Type 2(CAV-2)

LZR3398

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產品:

釀酒酵母HAase (Hyaluronidase) ELISA Kit  拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

糙皮側耳HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus

佐久氏沙雷氏菌ID(deiodinase) ELISA Kit拉丁屬名: Serratia marcescens

總狀毛霉IgG-Fc ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor racemosus Fresenius

釀酒酵母IgA (Immunoglobulin A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

稻黑孢霉IgE (Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Nigrospora oryzae

缺陷短波單胞菌IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas  diminuta

IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit拉丁屬名: Starmerella  bombicola

靈芝(紅芝,赤芝)(可訂購)IgG2a (Immunoglobulin G2a) ELISA Kit拉丁屬名:  Ganoderma Lucidum (Leysser : Fries) Karsten

孟氏假單胞菌IgM (Immunoglobulin M) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mandelii

刺孢吸水鏈霉菌NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit用途: 產正放線酮,可防治多種植物真菌病害

白井盤多毛孢INHA (Inhibin A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

凝結芽胞桿菌INHB (Inhibin B) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus coagulans

金產色鏈霉菌INHbA (Inhibin Beta A) ELISA Kit  拉丁屬名: Streptomyces aureochromogenes

蟲草屬INHBP (Inhibin Binding Protein) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
犬腺體病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒規格MSH2 (mutS homolog 2)  MSH2抗原3,4-二羥基苯乙酸3,4-dihydroxyphenylacetic acid中藥標準品  分 子 式: C8H8O4 分 子 量: 168.14672

NKR(Neuromedin B Receptor)  神經激肽B受體(抗原)刺槐雙氫黃酮4H-1-Benzopyran-4-one,2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-, (2S)-對照藥材 分 子 式: C15H12O6 分 子 量: 288.25218

NF-L(Neurofilament triplet L)  低分子量神經絲蛋白(抗原)鄰苯二甲酸二異丙酯1,2-Benzenedicarboxylicacid, 1,2-bis(1-methylethyl) ester 高端化學試劑 分 子 式: C14H18O4 分 子 量: 250.29032

NF-M (Neurofilament triplet M)  中分子量神經絲蛋白(抗原)P:C(1:1,pH﹤5.0)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

NF-H(Neurofilament triplet H)  高分子量神經絲蛋白(抗原)檸檬烯dipentene其它化學試劑 分 子 式: C10H16 分 子 量: 136.23

NIS(Na+/I-symporter;NIS)  鈉碘轉運體蛋白(多肽抗原)雪松素Cedrin化學標準品 分 子 式: C15H18O6 分 子 量: 294.29982

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB)  細胞核因子或稱k基因結合核因子(多肽抗原)5-羥色胺鹽酸鹽3-(2-Aminoethyl)-1H-indol-5-ol hydrochloride中藥標準品  分 子 式: C10H12N2O.HCl 分 子 量: 212.67602


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