- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3403
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-13
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3403 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
犬諾瓦克病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Canine Norovirus | LZR3403 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
德沃斯氏菌ITGB3 (Integrin Beta 3) ELISA Kit拉丁屬名: Devosia sp.
Burkholderia metallica Vanlaere et al.MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit 用途: 固氮。
泡盛曲霉MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus awamori
枯草芽孢桿菌MIF (Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
假單胞菌H4 (Histone H4) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp.
大莖點(diǎn)菌MHCI/H-2Ⅰ(Major Histocompatibility ComplexⅠ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
仁果叢梗孢MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ(Major Histocompatibility Complex-Ⅱ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ(Major Histocompatibility Complex-Ⅲ) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
美澳型核果褐腐病菌HAT (Histone Acetyltransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Monilinia fructicola
橄欖色盤多毛孢CA15-3 (Carbohydrate Antigen 15-3) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotia olivacea
黑曲霉MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
白地霉MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum candidum
岸海桿狀菌MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter litoralis
MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
腸桿菌屬MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter sp.
犬諾瓦克病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書PPAR Gamma (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma) 過氧化酶活化增生受體γ(抗原)哈巴俄苷Harpagosid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H30O11 分 子 量: 494.4884
PP2Ac 蛋白磷酸酶4(抗原)7-羥基馬兜鈴酸A7-Hydroxyaristolochic acid A中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C13H12N4Os 分 子 量: 272.32558
Runx3 一種新發(fā)現(xiàn)的基因(抗原)石杉?jí)A丙5,9-Methanocycloocta[b]pyridin-2(1H)-one,5-amino-11-ethenyl-5,6,9,10-tetrahydro-7-methyl-, (5R,9R,11R)- (9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H18N2O 分 子 量:
RRAD (Ras-related associated with diabetes ) RRAD(多肽抗原)大果桉醛 A5--1R--1--11S-7R--7-Hydroxy-3-3-7-11-tetramethyltricyclo-6-3-0-0-2-4-undec-11-yl--3-methylbutyl--2-4-6-trihydroxybenzene-1-3-dicarbaldehyde對(duì)照藥材 分 子 式: C28H40O6 分 子 量: 472.6136
SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1) 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(抗原)鼠李糖L-rhamnose monohydrate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H12O5.H2O 分 子 量: 182.17
shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1) shank1多肽抗原7-乙基喜樹堿(S)-4,11-Diethyl-4-hydroxy-1H-pyrano[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H20N2O4 分 子 量: 376.4052
slc22A17 (solute carrier famili 22) 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族22成員17(多肽抗原)款冬酮2-Pentenoic acid,3-methyl-,(1S,3aR,5R,7S,7aS)-1-[(1R)-1-(acetyloxy)ethyl]octahydro-4-methylene-7-(1-methylethyl)-2-oxo-1H-inden-5-ylester, (2E)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H34O5 分 子 量: 390.51306