產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯祖 |
貨號 | LZR3389 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
唾液彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Campylobacter sputorum | LZR3389 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
芽孢桿菌GAL9 (Galectin 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
生脂固氮螺菌GAL12 (Galectin 12) ELISA Kit 拉丁屬名: Azospirillum lipoferum
不解糖鞘氨單胞菌gGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas asaccharolytica
枯草芽孢桿菌GJb1 (Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
腐皮鐮孢GIP (Gastric Inhibitory Polypeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Fusarium solani
油菜菌核病菌GT-34 (Gastrin 34) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
球形芽胞桿菌CA199 (Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有用作耐重金屬基因資源潛力。
麥根腐平臍蠕孢GKN2 (Gastrokine 2) ELISA Kit 用途: 教學科研
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少根根霉GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus arrhizus
異常漢遜酵母異常變種GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala
痂圓孢屬GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
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木荷考克娃酵母GTFIIB (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit 拉丁屬名: Kockovaella schimae
唾液彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8) 成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8 (抗原)小豆蔻明Cardamonin中藥標準品 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.28
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GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease ) 3-磷酸甘油醛脫氫酶(抗原)6-O-香草酰基筋骨草醇b-D-Glucopyranoside, 1,4a,5,6,7,7a-hexahydro-7-hydroxy-5-[(4-hydroxy-3-methoxybenzoyl)oxy ]-7-methylcyclopenta[c]pyran-1-yl, (1S,4aR,5R,7S,7aS)-對照藥材 分 子 式: C23H30O12 分 子 量:
Galectin-3 半乳糖凝集素-3(抗原)pH標準緩沖粉劑(pH=6.86)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GCS (glucosylceramide synthase, GCS) 葡萄糖神經酰胺合成酶(抗原)脫水長葉九里香內酯Phebalosin對照藥材 分 子 式: C15H14O4 分 子 量: 258.26926
GFP 綠色熒光蛋白肌醇Inositol中藥標準品 分 子 式: C6H12O6 分 子 量: 180.16
Recombinant EGFP protein 重組增強型綠色熒光莪術醇curcumol中藥標準品 分 子 式: C15H24O2 分 子 量: 236.35