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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

鐮孢霉FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

漏斗狀側耳（鳳尾菇）FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 3) ELISA Kit  拉丁屬名: Pleurotus  sajor-caju

貝爾氏菌屬FMOD (Fibromodulin) ELISA Kit  拉丁屬名: Belliella  sp.

類黃假單胞菌FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit  拉丁屬名: Pseudomonas synxantha

葡萄座腔菌FN (Fibronectin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

粗糙脈孢菌FLNa (Filamin A) ELISA Kit  拉丁屬名: Neurospora crassa

喜堿運動節桿菌Flt3 (FMS-like Tyrosine Kinase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter  alkaliphilus

蠟樣狀芽孢桿菌FAK (Focal Adhesion Kinase) ELISA Kit   拉丁屬名: Bacillus  cereus

豬放線桿菌FSH (follicle-stimulating hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Actinobacillus suis

膜醭畢赤酵母FST (Follistatin) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia membranifaciens

蘇云金芽胞桿菌FOXP3 (Forkhead Box Protein P3) ELISA Kit   拉丁屬名: Bacillus  thuringiensis

羊肚伴生菌FPR2 (Formyl Peptide Receptor 2) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

黃棕色鏈霉菌FK (Fractalkine) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces flavofuscus

德爾布有孢酵母GAD-Ab-IgM (Glutamic Acid Decarboxylase Autoantibody IgM)ELISA Kit拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii

乳桿菌F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
幽門彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Deltex-1  (DTX1) (Deltex protein 1)抗原梓苷，梓實糖苷b-D-Glucopyranoside,(1aS,1bS,2S,*R,6S,6aS)-1a,1b,2,*,6,6a-hexahydro-6-[(4-hydroxybenzoyl)oxy]-1a-(hydroxymethyl)oxireno[4,5]cyclopenta[1,2-c]pyran-2-yl對照藥材 分 子 式: C22H26O12 分 子 量: 482.43464

DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT)  DISC1 N端抗原雷公藤內酯甲Wilforlide A中藥標準品  分 子 式: C30H46O3 分 子 量: 454.68

DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT)  DISC1 C端抗原似梨木雙黃酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Ochnaflavone7-O-β-D-gluco-pyranoside中藥標準品  分 子 式: C30H18O10 分 子 量: 538.45792

DR3/TRAMP (death receptor-3)  DR3 死亡受體（抗原）硫酸魚精蛋白溶液(10%)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16)  人病毒16型E7蛋白抗原知母皂苷CTimorsaponin C中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

EGF-R (Epidemal growth factor receptor)  表皮生長因子受體（抗原）糖精Benzo[d]isothiazol-3(2H)-one 1,1-dioxide化學標準品 分 子 式: C7H5NO3S 分 子 量: 183.1845

Eukaryotic aspartyl protease(Rice)  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)（抗原）鹽酸吐根酚堿Cephaeline hydrochloride中藥標準品  分 子 式: C28H40Cl2N2O4 分 子 量: 539.53