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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3353
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-01-14
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3353 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛病毒3型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Bovine Hepervirus 3 (BHV-3)3（） | LZR3353 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
楊爛皮殼蕉孢菌 PI3/Elafin (Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
腐蝕檸檬酸桿菌TTPα (Alpha Tocopherol Transfer Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Citrobacter rodentium
pRE112 FNDC5 (Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主：DH5α，BL21
黑馬朗假絲酵母IL-21 (Interleukin 21) ELISA Kit拉丁屬名: Candida haemulonii
愛媛鏈輪絲菌SSADH (Succinate-semialdehyde dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有弱的抗菌活性。
枯草芽孢桿菌POSTN/OSF-2 (Periostin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
雞傷寒沙門氏菌MMP-15 (Matrix Metalloproteinase 15) ELISA Kit 拉丁屬名: gallinarum
亞球毛殼MMP-14 (Matrix Metalloproteinase 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Chaetomium subglobosum
干草寒冷桿菌VLDL (Very Low Density Lipoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Frigoribacterium faeni faeni
谷氨酸棒桿菌LCAT (Lecithin-Cholesterol Acyltransferase) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
纖維微菌屬CYP2E1 (Cytochrome P450, family 2, subfamily E, polypeptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Cellulosimicrobium sp.
鴨疫里氏桿菌UCRP (Ubiquitin Cross Reactive Protein) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens
Rhizobium miluonenseDAG1 (Dystrophin Associated Glycoprotein 1) ELISA Kit用途: 固氮
優(yōu)洛菌素鏈霉菌HABP1/C1QBP (Hyaluronan Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces eurocidicus
牛病毒3型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體抗原異嗪皮啶7-O-beta-D-葡萄糖苷2H-1-Benzopyran-2-one,7-(a-Dglucopyranosyloxy)- 6,8-dimethoxy- 化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H14O4 分 子 量: 246.25856
Phospho-PAK4 (Ser99) peptide 磷酸化p21激活激酶4多肽抗原DNase/RNase混合液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PAK7/PAK5/MBT 激活激酶PAK7/PAK5抗原乙酰托品醇8-Azabicyclo[3.2.1]octan-3-ol,8-methyl-, 3-acetate, (3-endo)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H17NO2 分 子 量: 183.24748
PAR-1 (Protease-activated receptors-1) 蛋白酶激活受體-1抗原2,6-二氟苯甲酸2,6-Difluorobenzoic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C7H4O2F2 分 子 量: 158.10226
PAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原乳酸銀顯影液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
PAR4 (protease-activated receptor 4) 蛋白酶活化受體4/細(xì)胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗原毛蕊異黃酮苷CALYCOSIN 7-O-GLUCOSIDE中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H22O10 分 子 量: 446.40408
PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus 多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端)去甲異波爾定 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H19NO4 分 子 量: 313.34776
