- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3351
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3351 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
牛病毒1型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Bovine Hepervirus 1 (BHV-1)1 | LZR3351 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
枯草芽孢桿菌THRα (Thyroid Hormone Receptor Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
微小桿菌NFRκB (Nuclear Factor Related To Kappa B Binding Protein) ELISA Kit用途: 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中以5mg/l的孔雀石綠為碳源,與1/6LB共代謝培養(yǎng),2天內(nèi)孔雀石綠降解率大于70%
釀酒酵母TNKS1 (Tankyrase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
蟻巢傘屬TNKS2 (Tankyrase 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
金灰青霉PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium aurantiogriseum
露濕漆斑菌Neopterin ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌ME20M (Melanoma Associated ME20) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium herbae
淺綠氣球菌PXR (Pregnane X Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Aerococcus viridans
小刺青霉ALOX15B (Arachidonate-15-Lipoxygenase, Type B)ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium spinulosum Thom
枯草芽孢桿菌RELB (V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
松杉靈芝IL-24 (Interleukin 24) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma tsugae Murrill
尖孢鐮刀菌棉花專(zhuān)化型AIM2 (Absent In Melanoma 2) ELISA Kit用途: 生理小種7號(hào),研究用
梨頭霉(+)TSPAN30/CD63 (Tetraspanin 30) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
凸臍儒孢菌BANP (BTG3 Associated Nuclear Protein) ELISA Kit 用途: 研究
古布爾班克氏菌屬PRKG1 (Protein Kinase, cGMP Dependent Type I) ELISA Kit拉丁屬名: Gulbenkiania sp.
牛病毒1型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū)OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原L-瓜氨酸L-Citrulline氨基酸類(lèi) 分 子 式: C6H13N3O3 分 子 量: 175.18572
ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原里奧林Bullatine B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H39NO6 分 子 量: 437.56956
OTR(oxytocin receptor) 縮宮素受體異藤黃氧蒽酮 EIsogarciniaxanthone E對(duì)照藥材 分 子 式: C28H32O6 分 子 量: 464.55008
OXR (Orexin receptor) 食欲素受體(多肽)龍血素BLoureirin B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H20O5 分 子 量: 316.35
P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related) 增殖潛能相關(guān)蛋白抗原龍腦(1R,2S,4R)-rel-1,7,7-Trimethylbicyclo[2.2.1]heptan-2-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H18O 分 子 量: 154.24932
P19ARF p19ARF基因抗原茴香腦1-Methoxy-4-(prop-1-en-1-yl)benzene中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H12O 分 子 量: 148.20168
phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原黃楊堿9,19-CYCLOPREGNANE-3,20-DIAMINE,N,N',4,4,14-PENTAMETHYL-, (3,5,20S)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C26H46N2O 分 子 量: 402.66