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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3338
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-11
- 更新日期： 2025-01-14
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3338 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
波氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Bordetella pertussis | LZR3338 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌PKP1 (Plakophilin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
巨大芽孢桿菌PKP2 (Plakophilin 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
地衣芽胞桿菌ANGPTL8 (Angiopoietin Like Protein 8) ELISA Kit用途: 分類、研究，具有 固氮生物肥料潛力。
謝瓦曲霉PAC3 (Platelet Associated Complement 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus chevalieri
草假單胞菌PA-IgM (Platelet Associated Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas graminis
弗氏鏈霉菌PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces fradiae
木菇屬PFKP (Phosphofructokinase, Platelet) ELISA Kit用途: 食用菌
瓜果腐霉PDGF (Platelet-Derived Growth Factor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母PDGFC (Platelet Derived Growth Factor C) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
優(yōu)美氈被菌PDGFD (Platelet Derived Growth Factor D) ELISA Kit 拉丁屬名: Spongipellis delectans
黃色刺孢鏈霉菌PDGFRα (Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flavospinosporus
克羅諾桿菌屬PF4 (Platelet Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Cronobacter sp.
嗜熱側(cè)孢霉PF4V1 (Platelet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
羅倫隱球酵母GYPE (Glycophorin E) ELISA Kit 拉丁屬名: Cryptococcus laurentii
開菲爾乳桿菌SSTR4 (Somatostatin Receptor 4) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus kefir
波氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格lamin A 核纖層蛋白A抗原白花前胡素EPraeruptorin E中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H28O7 分 子 量: 428.47
LOX-1/OLR1 凝集素樣氧化型受體Acr-Bis(40%,19:1)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
LPLUNC1 人癌基因多肽抗原二甲苯青FF溶液(2.5%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1) 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗原亞硝酸鈉水溶液(1%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
ACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原)阿魏酸乙酯Ethyl 3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)acrylate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C12H14O4 分 子 量: 222.23716
Integrin alpha E2 peptide 整合素alpha E2抗原腺苷Adenosine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H13N5O4 分 子 量: 267.24132
Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18) 巨噬細(xì)胞表面分子抗原2-萘酚-8-磺酸鉀Potassium 7-hydroxynaphthalene-1-sulfonate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H7O4S-.K+ 分 子 量: 262.32348
