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PCR反應鑒定——PCR反應條件:

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產品：

Paraconiothyrium sp.PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

火木層孔菌LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

異常漢遜酵母LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit拉丁屬名: Hansenula  anomala

鍺栓孔菌 (淡黃褐栓菌)LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes ochracea

德氏乳桿菌保加利亞亞種IL4I1 (Interleukin 4 Induced Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. bulgaricus

脫硫弧菌脫硫亞種（脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌）GYS1 (Glycogen Synthase 1, Muscle) ELISA Kit拉丁屬名: Desulfovibrio desulfuricans subsp. desulfuricans

松針散斑殼GYS2 (Glycogen Synthase 2, Liver) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

菌生假絲酵母OSMR (Oncostatin M Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Candida laureliae

腫痂鏈霉菌MK (Midkine) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces turgidiscabies

光柄滑銹傘PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

遼寧類芽孢桿菌HNP1-3 (Neutrophil Peptide 1-3) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus liaoningensis

蟻巢傘屬NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希菌NAP (Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: coli

運動節桿菌PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis

釀酒酵母ADAM22 (A Disintegrin And Metalloprotease 22) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
達氏疏螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書MPO peptide  髓過氧化物酶抗原單密利特苷化學標準品 分 子 式:  分 子 量:

MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)  多藥耐藥相關蛋白2茶黃素-3,3'-雙沒食子酸Theaflavine-3,3'-digallate中藥標準品  分 子 式: C43H32O20 分 子 量: 868.702180000001

MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5)  多藥耐藥相關蛋白5抗原人參皂苷Rg2Ginsenoside Rg2中藥標準品  分 子 式: C42H72O13 分 子 量: 785.01328

MrpL28 (mitochondrial ribosomal protein L28)  線粒體核糖體蛋白L28(抗原)高紫檀素Homopterocarpin化學標準品 分 子 式: C17H16O4 分 子 量: 284.30654

MLH1(Mutl homolog l gene)  錯配修復蛋白1抗原丹葉大黃素-3'-O-葡萄糖苷rhapontigenin 3'-O-beta-D-glucopyranoside化學標準品 分 子 式: C21H24O9 分 子 量: 420.41

MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1)  胃粘液素抗原苦瓜皂苷 GMomordicoside G對照藥材 分 子 式: C38H60O8 分 子 量: 644.8782

MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B)  褪黑素受體1B抗原二十五烷pentacosane化學標準品 分 子 式: C25H52 分 子 量: 352.68038