- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3322
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3322 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
球孢白僵菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Beauveria bassiana | LZR3322 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
匍枝根霉原變種Grb10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer
白僵菌Grb14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin
香菇—五香1號(hào)Grb2 (Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
猴假單胞菌OXB (Orexin B) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas simiae
奇異球菌RLR (Retinoic Acid Inducible Gene/RIG-Like Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus sp.
刺盤孢菌RB1 (Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母PRB (Retinoblastoma Tumor Suppressor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
鍺栓孔菌CYPA (Cyclophilin A) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes ochracea
芽胞桿菌CYPB (Cyclophilin B) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
臺(tái)灣根霉CYPD (Cyclophilin D) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus formosensis Nakazawa
蘋果落葉交鏈孢霉NRP2 (Neuropilin 2) ELISA Kit用途: 植物病原物,為該病的防治提供依據(jù)。
假單胞菌屬CS (Citrate Synthase) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas extremaustralis
硬桿菌OGG1 (8-Oxoguanine Glycosylase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
根瘤菌ECFR (Eosinophil Chemotactic Factor Receptor) ELISA Kit用途: 固氮
球孢白僵菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類病毒8抗原哌嗪(六水)Piperazine hexahydrate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C4H10N2.6H2O 分 子 量: 194.22
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類病毒8抗原棉籽糖RAFFINOSE中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H32O16 分 子 量: 504.43708
HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P) 人類病毒8抗原安五酸Lanosta-8,24-dien-26-oicacid, 3-oxo-, (24Z)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H46O3 分 子 量: 454.68444
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗原SDS-PAGE凝膠配制試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗原氯化飛燕草素-3-O-半乳糖苷1-Benzopyrylium, 3-(b-D-galactopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-,chloride (1:1)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21O12+.Cl- 分 子 量: 479.6705
Histone H1b(Histone H1.4) 組蛋白H1b抗原去氫克班寧dehydrocrebanine對(duì)照藥材 分 子 式: C20H19NO4 分 子 量: 337.36916
HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙酰化酶1抗原Acr-Bis(29.1%:0.9%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: