- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3320
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-14
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3320 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
箭毒蛙壺菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Batrachochytrium dendrobatidis | LZR3320 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大腸埃希氏菌NCAM/CD56 (Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
猴頭菌—50043L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
米羅布里格小單孢菌NT-3 (Neurotrophin-3) ELISA Kit 拉丁屬名: Micromonospora mirobrigensis
米曲霉NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus Oryzae
蘇云金芽孢桿菌NTRK2 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis Berliner
大腸埃希菌NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3 ) ELISA Kit 拉丁屬名: coli
西西布哈加瓦氏菌NAIP (Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bhargavaea cecembensis
谷氨酸棒狀桿菌ATCC13032NPHN (Nephrin) ELISA Kit規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞
米根霉GTEAGE (Glomerular Tissue Extract Advanced Glycosylation End Products) ELISA Kit用途: 飼料用酶的篩選
慢生根瘤菌GROβ (Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮良好
變異短波單胞菌GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas variabilis
多粘芽孢桿菌GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus polymyxa
美澳型核果褐腐病菌GDF10 (Growth Differentiation Factor 10) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黑曲霉GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
平菇GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
箭毒蛙壺菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商HA tag HA tag標(biāo)簽多肽紅細(xì)胞洗滌液(pH7.2)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
HA tag(map) HA tag標(biāo)簽(分支多肽)穿心蓮內(nèi)酯苷2(3H)-Furanone,3-[2-[(1R,4aS,5R,6R,8aS)-5-[(b-D-glucopyranosyloxy)methyl]decahydro-6-hydroxy-5,8a-dimethyl-2-methylene-1-naphthalenyl]ethylidene]dihydro-4-hydroxy-,(3E,4S)-對(duì)照藥材 分 子 式: C26H40O10 分 子 量: 512.5898
HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝細(xì)胞生長因子激活物抑制因子抗原氯化飛燕草素-3-O-葡萄糖苷1-Benzopyrylium, 3-(b-D-glucopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-,chloride (1:1)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H21O12+.Cl- 分 子 量: 500.83724
HBA1(hemoglobin alpha 1) 人類血紅蛋白α1抗原甲基當(dāng)藥寧1,8-Dihydroxy-2,6-dimethoxy-9H-xanthen-9-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H12O6 分 子 量: 288.25218
VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 病毒X蛋白(HBxAg)抗原鹽酸藥根堿Jatrorrhizine Hydrochloride。化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H20NO4 分 子 量: 373.84
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 病毒X蛋白(HBxAg)抗原花旗松素Taxifolin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H12O7 分 子 量: 304.25
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原山柰酚-3-O-蕓香糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-[[6-O-(6-deoxy-a-L-mannopyranosyl)-b-D-glucopyranosyl]oxy]-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H30O15 分 子 量: