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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3314
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-01-15
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3314
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Bartonella bacilliformis

LZR3314


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

多主葡萄殼菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

瓜亡革菌TR (Thrombin Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

平菇PT (Prothrombin) ELISA Kit用途: 食用、藥用

木糖葡糖酸醋桿菌F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit拉丁屬名: Gluconacetobacter xylinus

釀酒酵母KERA (Keratocan) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

美澳型核果褐腐病菌VCL (Vinculin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鼠傷寒沙門氏菌DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit拉丁屬名: typhimurium

殼菌FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

熱帶假絲酵母EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida  tropicalis

枇杷假尾孢褐斑病CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

香菇DPT (Dermatopontin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

毛簇木霉SRF/IF (Skin Reactive Factor/Inflammatory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma velutinum

解淀粉芽孢桿菌植物亞種CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  amyloliquefaciens subsp. plantarum

禽腺病毒SYK (Spleen Tyrosine Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Avian       adenovirus
桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格GAPDH  3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗原蔗糖咪唑溶液(2.25mol/L,pH7.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CXCR3/CD183 peptide  細(xì)胞表面趨化因子受體3抗原絡(luò)緦trans-Cinnamyl β-D-glucopyranoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C15H20O6 分 子 量: 296.3157

GATA-3(GATA binding factor 3)  GATA結(jié)合蛋白3抗原粘毛黃芩素III4H-1-Benzopyran-4-one,2-(3,6-dihydroxy-2-methoxyphenyl)-5,7-dihydroxy-8-methoxy-對(duì)照藥材 分 子 式: C17H14O8 分 子 量: 346.28826

GATA-4(GATA binding factor 4)  GATA結(jié)合蛋白4抗原Western封閉液(奶粉)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Gax(growth arrest-specific homeobox)  生長終止特異性同源盒基因抗原麥角甾-5,24(28)-二烯-3,7,16-三醇Ergosta-5,24(28)-diene-3,7,16-triol,(3b,7a,16b)- (9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C28H46O3 分 子 量:

GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8)  生長分化因子8抗原腦苷脂BCerebroside B對(duì)照藥材 分 子 式:  分 子 量:

GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor)  膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原銀杏雙黃酮GINKGETIN中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C32H22O10 分 子 量: 566.51108

 


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