- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3314
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-11
- 更新日期: 2025-01-15
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3314 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Bartonella bacilliformis | LZR3314 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
多主葡萄殼菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
瓜亡革菌TR (Thrombin Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
平菇PT (Prothrombin) ELISA Kit用途: 食用、藥用
木糖葡糖酸醋桿菌F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit拉丁屬名: Gluconacetobacter xylinus
釀酒酵母KERA (Keratocan) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
美澳型核果褐腐病菌VCL (Vinculin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鼠傷寒沙門氏菌DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit拉丁屬名: typhimurium
殼菌FSA (Fetal Sulfoslycoprotein Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
熱帶假絲酵母EED (Embryonic Ectoderm Development) ELISA Kit 拉丁屬名: Candida tropicalis
枇杷假尾孢褐斑病CTAGE (Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
香菇DPT (Dermatopontin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
毛簇木霉SRF/IF (Skin Reactive Factor/Inflammatory Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma velutinum
解淀粉芽孢桿菌植物亞種CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum
禽腺病毒SYK (Spleen Tyrosine Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Avian adenovirus
桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗原蔗糖咪唑溶液(2.25mol/L,pH7.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CXCR3/CD183 peptide 細(xì)胞表面趨化因子受體3抗原絡(luò)緦trans-Cinnamyl β-D-glucopyranoside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C15H20O6 分 子 量: 296.3157
GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結(jié)合蛋白3抗原粘毛黃芩素III4H-1-Benzopyran-4-one,2-(3,6-dihydroxy-2-methoxyphenyl)-5,7-dihydroxy-8-methoxy-對(duì)照藥材 分 子 式: C17H14O8 分 子 量: 346.28826
GATA-4(GATA binding factor 4) GATA結(jié)合蛋白4抗原Western封閉液(奶粉)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒基因抗原麥角甾-5,24(28)-二烯-3,7,16-三醇Ergosta-5,24(28)-diene-3,7,16-triol,(3b,7a,16b)- (9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C28H46O3 分 子 量:
GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生長分化因子8抗原腦苷脂BCerebroside B對(duì)照藥材 分 子 式: 分 子 量:
GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原銀杏雙黃酮GINKGETIN中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C32H22O10 分 子 量: 566.51108