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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3301
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-15
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3301 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
炭疽芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Bacillus anthracis | LZR3301 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
球孢白僵菌OTR (Oxytocin Receptor) ELISA Kit用途: 鞘翅目天牛屬害蟲生物防治
松生擬層孔菌PDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit拉丁屬名: Fomitopsis pinicola
香菇7NFE2L2 (Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
簡青霉HDL (High Density Lipoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium simplicissimum
土生叢毛單胞菌DNP-Ab (Deoxyribonucleic Protein Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Comamonas terrigena
暗產(chǎn)色鏈霉菌HBsAg (Hepatitis B surface antigen) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes
扁菌Pro-MMP-10 (Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
靈芝屬Pro-MMP-13 (Pro-Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
里亞氏須腹菌SIRPA (Signal Regulatory Protein Alpha) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
PedobacterPTX 3/TSG-14 (Pentraxin 3, Long) ELISA Kit拉丁屬名: Pedobacter koreensis
大腸埃希氏菌PDGF-AA (Platelet Derived Growth Factor-AA) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
美味側耳(紫孢側耳)PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit 用途: 食用
硬毛栓孔菌PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit 拉丁屬名: Trametes trogii
哈茨木霉PCSK9 (Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 9) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
麻孢毛殼RBP4 (Retinol Binding Protein 4, Plasma) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium gelasinosporum
炭疽芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶（抗原）南五味子木脂素L5,8-Epoxybenzo[3,4]cycloocta[1,2-f][1,3]benzodioxole,5,6,7,8-tetrahydro-1,2,3,13-tetramethoxy-6,7-dimethyl-, (5S,6S,7R,8R,13aS)-化學標準品 分 子 式: C23H26O7 分 子 量:
DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結缺失基因抗原疏展香茶菜寧BKaur-16-en-15-one,1-(acetyloxy)-7,20-epoxy-6,7-dihydroxy-, (1a,6b,7a)- (9CI)化學標準品 分 子 式: C22H30O6 分 子 量:
DCX(Doublecortin) 雙皮質(zhì)素抗原HEPES緩沖液(10×,含鈣鎂)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
DDB2(DNA damage-binding protein 2) 損傷DNA結合蛋白2抗原乙酸-EDTA緩沖液(pH5.5)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Defensin Beta1 防御素β1抗原植酸鋅Zinc phytate中藥標準品 分 子 式: C6H6O24P6Zn6 分 子 量: 1040.28
Defensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)二氫椒苫素dihydromethysticin中藥標準品 分 子 式: C15H16O5 分 子 量: 276.28454
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原（小鼠）磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液(0.2mol/L,pH5.8-8.0)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
