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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3278
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-10
- 更新日期： 2025-01-15
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3278 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
構(gòu)巢曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Aspergillus nidulans | LZR3278 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
禾谷絲核菌PKN1 (Protein Kinase N1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
伊平屋橋大洋芽孢桿菌PKIα (Protein Kinase Inhibitor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Oceanobacillus iheyensis
白僵菌PKIβ (Protein Kinase Inhibitor Beta) ELISA Kit 用途: 害蟲生物防治
交鏈孢霉PKIγ (Protein Kinase Inhibitor Gamma) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
奈瑟菌PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Neisseria meningitidis
金龜子綠僵菌PTK (Protein Tyrosine Kinase) ELISA Kit用途: 生物防治
谷氨酸棒桿菌PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
釀酒酵母PP (Protein Phosphatase) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
腐生葡萄球菌腐生亞種PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母PRSS1 (Protease, Serine, 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
喜肌費爾酵母PRSS12 (Protease, Serine 12) ELISA Kit 拉丁屬名: Fellozyma inositophila
橄欖鏈霉菌PR3Ab (Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces olivaceus
青紫黑鏈霉菌PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Syntrophomonas glaucovioatratus
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34PCI (Protein C Inhibitor ) ELISA Kit 規(guī)格: 1ml
乳微桿菌PLP (Proteolipid Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
構(gòu)巢曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）臺氏液粉劑(Tyrode's Solution,無鈣)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Insulin protein (Active) 重組人細(xì)胞因子堿性磷酸酶封閉液(Levamisole法)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Trk C 神經(jīng)生長因子受體的一種（抗原）植物酸性磷酸酶(ACP)提取試劑盒標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT) 促甲狀腺素受體（抗原）珠子草素1,3-Benzodioxole,6-[(2R,3R)-4-(3,4-dimethoxyphenyl)-2,3-bis(methoxymethyl)butyl]-4-methoxy-,rel-對照藥材 分 子 式: C24H32O7 分 子 量: 432.50668
Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨酸蛋白酶8抗原吉馬替康Gimatecan中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H25N3O5 分 子 量: 447.4831
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲狀腺素受體（抗原）鹽酸利多卡因2-(Diethylamino)-N-(2,6-dimethylphenyl)acetamide hydrochloride hydrate化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C14H22N2O.HCl.H2O 分 子 量: 288.8135
TY3H ( Tyrosine Hydroxylase ) 酪氨酸羥化酶（抗原）4-表-莪術(shù)醇4-Epi-curcumenol化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
